环境微生物学第七章微生物生长与生活环境.pptVIP

第1页，共41页，星期日，2025年，2月5日第七章微生物生长与生活环境第一节微生物纯培养第二节微生物纯培养群体生长规律第三节微生物的生活环境第2页，共41页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养一、微生物纯培养的概念实验室条件下，由一个微生物细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。第3页，共41页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术纯培养基本步骤：稀释平皿法划线法单细胞挑取法纯培养方法(2)培养(1)分离第4页，共41页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术1、稀释平板分离法：倾注平板法和涂布平板法。基本过程：（1）梯度稀释过程；（2）分离培养过程涂布倾注梯度稀释过程10-110-210-310-410-510-6第5页，共41页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术4)操作要点：无菌操作稀释平板分离法使用过程中的几个问题1)梯度稀释度的确定：需分离微生物在样品中的数量2)选择菌落接种的依据：a、菌落特征；b、菌体的特征3)微生物纯培养的标准：菌落特征一致性第6页，共41页，星期日，2025年，2月5日2、单细胞挑取法：从待分离材料中挑取一个细胞来培养，从而获得纯培养的过程。第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术第7页，共41页，星期日，2025年，2月5日3、平皿划线法(P１３９图７-４)用接种环沾少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术第8页，共41页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养三、目标微生物纯培养筛选的基本思路１、待分离样品的确定２、培养基的选择３、纯化过程环境条件的控制（温度、空气、PＨ、抑制剂）（Ｐ１３８－１４１）第9页，共41页，星期日，2025年，2月5日（一）纯培养的保存试管斜面培养基低温、干燥、隔绝空气第一节微生物纯培养四、纯培养的保存与复壮1、灭菌彻底2、棉塞大小要合适3、无菌操作保存过程的注意点：防止杂菌污染。第10页，共41页，星期日，2025年，2月5日（二）纯培养的衰退与复壮第一节微生物纯培养四、纯培养的保存与复壮衰退的原因：衰老、变异衰退的表现：生长缓慢优良性状的丧失抗逆性下降衰退的预防：控制继代频率创造良好的培养条件采取有效的保存方式复壮狭义（被动）广义（主动）复壮方法：选优汰劣第11页，共41页，星期日，2025年，2月5日第二节微生物纯培养群体生长规律微生物生长的指标(生物量的测定)细胞群体数量的增加细胞群体总重量增加从群体水平上衡量(间接的测定方法)第12页，共41页，星期日，2025年，2月5日一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律微生物生长量的测定微生物数量的测定显微镜直接计数法稀释平板计数法最大概率法比浊法称重法含N量测定法DNA含量测定法ATP含量测定法代谢活性法微生物重量的测定第13页，共41页，星期日，2025年，2月5日(一)微生物数量的测定1、显微镜直接计数法使用细菌计数板或血球计数板在显微镜下直接计数。优点：操作简便，计数直观。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律第14页，共41页，星期日，2025年，2月5日(一)微生物数量的测定2、稀释平板计数法对样品稀释培养，据形成的菌落数计数。优点：传统计数方法。对设备要求不高。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律10-310-510-410-6第15页，共41页，星期日，2025年，2月5日(一)微生物数量的测定３、比浊计数法根据细菌悬浮液的吸光度测定其数量。优点：简便，直接。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律第16页，共41页，星期日，2025年，2月5日(二)微生物重量的测定1、