生化制品检测技术三磷酸腺苷的检测22课件.pptxVIP

生化制品检测技术三磷酸腺苷的检测

21三磷酸腺苷的工艺路线（四）

产氨短杆菌直接发酵法某些微生物在适量浓度的Mn2+存在时，其5′-磷酸核糖、焦磷酸核糖、焦磷酸核糖激酶和核苷酸焦磷酸化酶，能从细胞内渗出，若在培养基中加入嘌呤碱，可分段合成相应的核苷三磷酸。已知棒状杆菌、小球杆菌、节杆菌等都能在含有腺嘌呤的培养基中合成ATP，目前用的生产菌株为产氨短杆菌Bl-787。此法也视作酶合成法，反应过程为：三磷酸腺苷的工艺路线（四）

1．工艺路线产氨短杆菌直接发酵生产ATP的工艺流程如下。三磷酸腺苷的工艺路线（四）

（1）菌种培养菌种培养的培养基配方为葡萄糖10%，MgSO4·7H2O1%，尿素0.3%，CaCl2·2H2O0.01%，玉米浆适量，磷酸氢二钾1%，磷酸二氢钾1%，pH7.2。各级种子培养时间20～24h，接种量7%～9%，pH控制在6.8～7.2。。（2）发酵培养500L发酵罐培养28～30℃，24h前通风量l:0.5（V/V），24h后通风量1:1（V/V），40h后投入腺嘌呤0.2%，6501（椰子油酰胺）0.15%，尿素0.3%，升温至37℃，pH7.0。（3）提取、精制发酵液加热使酶失活后，调节pH至3～3.5，过滤去菌体，滤液通过769活性炭柱，用氨醇溶液洗脱，洗脱液再经Cl-型阴离子柱，经氯化钠-盐酸溶液洗脱，洗脱液用结晶法（同前），得ATP精品，得率2g/L发酵液。三磷酸腺苷的工艺路线（四）2．工艺过程

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