第六章工业微生物育种.ppt

以氨基酸缺陷为例进行说明将21种氨基酸按右表分为6组特点：每2组只有一种共同物质单一营养物质要求的鉴定：组别化合物代号117891011227121314153381216171844913161920551014171921661115182021135246第31页，共43页，星期日，2025年，2月5日（3）营养缺陷型的用途生产菌(氨基酸、核苷酸、维生素等高产菌需求)；研究代谢途径和杂交、转化等遗传规律的遗传标记。第32页，共43页，星期日，2025年，2月5日第六章工业微生物育种第1页，共43页，星期日，2025年，2月5日诱变育种是指利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，在促进其突变频率显著提高的基础上，从中挑选少数符合目的的突变株，以供科学实验或生产实践使用。第2页，共43页，星期日，2025年，2月5日效价：指有效成分的浓度。1ug/ul称为1单位1945时间1943194319431947195519711977目前发酵单位(u/ml)100250500～850～850～8000～2万～5万5～10万从青霉素产量看诱变育种第3页，共43页，星期日，2025年，2月5日诱变育种目的提高有效产物的产量改变菌种特性，提高产品质量简化工艺条件开发新品种第4页，共43页，星期日，2025年，2月5日诱变育种的过程选择合适的出发菌株制备待处理的菌悬液诱变处理筛选保藏和扩大试验第5页，共43页，星期日，2025年，2月5日一、诱变育种的实验准备（一）诱变前对出发菌株的了解1、区分不同菌落类型2、出现不同菌落类型原因出发菌株第6页，共43页，星期日，2025年，2月5日（二）全面了解菌种特性和生产性能的关系（三）了解影响菌种生长发育的主要因素1、培养基2、斜面培养基的制备技术3、接种量4、温度5、湿度6、药品和原材料质量第7页，共43页，星期日，2025年，2月5日（四）了解菌种有效产物中的各种组分在代谢合成过程中与培养条件的关系（五）建立一个准确、简便、快速检测产物的方法（六）研究最佳的菌种保藏培养基和培养条件第8页，共43页，星期日，2025年，2月5日二、诱变育种的步骤及方法（一）选择合适的出发菌株1、对一般菌株的要求野生菌株对诱变剂敏感最好选用来自生产中的自发突变菌株。具有有利性状（如高产、生长速度快、营养要求粗放、标记明显等）；可选用已发生过其他突变的菌株。第9页，共43页，星期日，2025年，2月5日2、选择具有一定生产能力或某种特性的菌株作为出发菌株3、选择纯种做出发菌株4、选择出发菌株应考虑其稳定性5、连续诱变育种过程中如何选择出发菌株6、采用多出发菌株7、了解菌种代谢特点第10页，共43页，星期日，2025年，2月5日（三）制备待处理的菌悬液1、选用单细胞或单孢子悬液（均匀、分散）目的：①使每个细胞能均匀接触诱变剂；②减少表型延迟现象（诱变后性状的分离及退化现象）同步培养（生理状态一致）菌龄：对诱变剂最敏感时期营养细胞：对数期孢子或芽孢：萌发前期第11页，共43页，星期日，2025年，2月5日菌悬液的制备方法物理诱变：生理盐水配制化学诱变：缓冲液配制菌悬液的浓度酵母菌，霉菌的孢子：106个/mL细菌，放线菌孢子：108个/mL不产孢子真菌：采用幼龄菌丝，三种方法制。制备原生质体作为诱变材料。第12页，共43页，星期日，2025年，2月5日诱变剂的选择（高效，简便）物理诱变剂：频度低、大损伤，难修复，且操作简便；化学诱变剂：频度高，点突变，易回复突变，操作麻烦。(NTG——超诱变剂）UV是最常用的一种诱变剂（四）诱变剂的选择及处理方法2、根据菌种特性和遗传稳定性来选择诱变剂3、参考出发菌株原有的诱变谱系来选择诱变剂第13页，共43页，星期日，2025年，2月5日常以杀菌率来表示相对剂量（剂量-存活率曲线）

最适剂量：既能扩大变异幅度，又能使变异向正突变范围移动的剂量。(P103)