电化学发光免疫分析方法 (2).pptVIP

*我国放射免疫分析法有很高的灵敏度，但存在着放射性防护和同位素污染等问题。*一种物质由电子激发态回复到基态时，释放出的能量表现为光的发射。***化学发光技术是近二、三十年来发展起来的一种测定方式*因此，如同RIA、FIA等一样利用免疫反应的特异性和化学发光本身的信号特异性形成了化学发光免疫测定（CLIA）技术。*CLIA是继酶免技术（EIA）、放免技术（RIA）、荧光免疫技术（FIA）和时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）之后发展的一项新兴测定技术。*化学发光酶免疫分析（CLEIA）以催化反应的酶为标记物，抗原抗体结合后，其中的酶可对发光体系产生催化作用，产生发光效应。发光信号与抗原抗体的量成正比。多用的发光体系是HRP-鲁米诺。化学发光免疫分析（CLIA）是一种用发光剂直接标记抗体的一类免疫分析法，用来标记的发光物必须能参与发光反应、标记和偶联后能稳定、理化性质和免疫特性不改变，多用吖啶酯类和苯酚类化合物。*酶免技术（EIA）、放免技术（RIA）、荧光免疫技术（FIA）、时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光二个过程,其中应用了“亲和素-生物素”放大系统，使检测的灵敏度大大提高*第1页，共27页，星期日，2025年，2月5日免疫分析法发光和化学发光化学发光免疫分析法电化学发光电化学发光免疫分析法甲状腺功能介绍第2页，共27页，星期日，2025年，2月5日免疫分析基于抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段；免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。第3页，共27页，星期日，2025年，2月5日免疫学检测历史演进放射免疫检测（现仍普遍使用于县级以上医院）；酶联免疫检测（各临床机构普遍使用）；以化学发光为代表的光生物学标记及免疫检测技术第4页，共27页，星期日，2025年，2月5日发光分类光照发光:发光剂（荧光素）经短波长入射光照射后进入激发态，当回复至基态时发出较长波长的可见光（荧光）。生物发光：指发生在生物体内的发光现象，比如萤火虫的发光，反应底物荧光素在荧光素酶的催化下利用ATP产能，生成激发态的氧化荧光素，后者在回复到基态时多余的能量以光子形式放出。化学发光（生物体内各种现象都与化学反应有关，都属于化学发光现象）第5页，共27页，星期日，2025年，2月5日化学发光化学发光是指伴随化学反应过程中所产生的光的发射现象，某些特殊的化学反应中，反应的中间体或产物由于吸收了反应释放的化学能而处于电子激发态，当其回到基态时以发射光子的形式释放能量。第6页，共27页，星期日，2025年，2月5日

化学发光分析根据化学发光反应在某一时刻的发光强度或反应的发光总量来确定反应中相应组分含量的分析方法，称为化学发光分析。第7页，共27页，星期日，2025年，2月5日化学发光分析优点化学发光具有荧光的特异性，同时不需要激发光，就避免了荧光分析中激发光杂散光的影响有很高的灵敏度，并且不像放射分析那样存在环境污染和健康危害第8页，共27页，星期日，2025年，2月5日化学发光分析缺点虽然化学发光具备很高的特异性和很小的干扰，但化学分析本身的不特异性，制约了整个方法的使用。第9页，共27页，星期日，2025年，2月5日化学发光免疫分析

（CLIA）CLIA是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性。第10页，共27页，星期日，2025年，2月5日化学发光免疫分析（CLIA）分类按标志物的不同及反应原理的不同分为直接化学发光免疫分析化学发光酶免疫分析电化学发光免疫分析第11页，共27页，星期日，2025年，2月5日电化学发光电化学发光（ECL）是通过在电极上施加一定的波形电压或电流信号进行点解反应的产物之间或与体系中共存组反应产生化学发光的现象第12页，共27页，星期日，2025年，2月5日定义:指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质特点：反应在电极进行化学发光剂：三联吡啶钌电子供体为：三丙胺电化学发光剂第13页，共27页，星期日，2025年，2月5日电化学发光免疫分析

（ECLI)ECLI是继EIA、RIA、FIA、时间分辨荧光免疫技术之后的新一代标记免疫测定技术；ECLI是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物；ECLI是目前最先进的标记免疫测定技术之一。第1