DB51_T2410-2017_应用微卫星DNA标记亚洲黑熊个体司法鉴定技术规范_四川省.docxVIP

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DB51

B61

四川省地方标准

DB51/T2410—2017

应用微卫星DNA标记亚洲黑熊个体司法鉴

定技术规范

四川省质量技术监督局

发布

DB51/T2410—2017

目次

前言...............................................................................II

范围..............................................................................1

1

2规范性引用文件....................................................................1

3术语、定义和缩略语................................................................1

4PCR引物的设计、合成与荧光标记.....................................................2

5DNA的提取与检测...................................................................2

6PCR反应与PCR产物测序.............................................................2

7基因分型..........................................................................3

8个体识别..........................................................................3

附录A（规范性附录）亚洲黑熊微卫星标记信息..........................................5

I

DB51/T2410—2017

前言

本标准按GB/T1.1－2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》的规定编写。

本标准由四川省林业厅提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准。

本标准主要起草单位：四川省林业科学研究院。

本标准主要起草人：靳伟毛毳费然夏云刘雯昊。

II

DB51/T2410—2017

应用微卫星DNA标记亚洲黑熊个体司法鉴定技术规范

1

范围

本标准规定了利用DNA简单重复序列微卫星分子标记对亚洲黑熊进行司法鉴定的原理、试剂、仪器、

分析步骤和结果判定标准。

2

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GA/T383-2002

SN/T1193-2003

法庭科学DNA实验室检验规范

基因检验实验室技术要求

NY/T1673-2008畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程

3

术语、定义和缩略语

下列术语和定义适用于本文件。

微卫星（microsatellite）是指基因组中由1-6个核苷酸为基本重复单元组成的DNA串联重复序列，

例如（AC）n、（ACG）n、（ATTT）n等，也称为短串联重复序列（Shorttandemrepeats，STR）或简

单重复序列（Simplesequencesrepeats，SSR）。在个体间重复次数发生变化的多态性微卫星位点，

可以作为微卫星标记使用。

是指利用亚洲黑熊组织（如毛发、血液、精液、肌肉组织等）或新鲜粪便提取的亚洲黑熊基因组DNA。

用一对寡核苷酸引物、四种脱氧核糖核苷酸（dNTPs）为原料，在合适的温度、离子条件和耐热DNA

聚合酶催化下，在体外人工合成特异的DNA片段的过程。

微卫星特异性引物Microsatellitespecificprimers

1

DB51/T2410—2017

用于亚洲黑熊微卫星DNA分子鉴定选用的一套微卫星引物。具有多态性、稳定性、重复性等综合特

点。统一推荐使用16个微卫星标记（附录A），其中1-11号为基本标记，12-16号为备选标记，可根据工

作目标选用合适数量的微卫星标记。只有当基本标记不够用时，才使用备选标记。

4PCR引物的设计、合成与荧光标记

推荐使用的16个微卫星标记的PCR引物序列设计参见附录A，将序列送有关公