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1克隆动物是使用亲本的什么细胞培育而成的?
2这些克隆动物的生殖方式属于?;
3.克隆动物培育过程中最大的困难
是什么?
动物细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个体,
4如何激发动物细胞表达其全能性呢?
细胞核移植技术;
Part.01
第2节动物细胞工程
三动物体细胞核移植技术和克隆动物;
重组细胞
取核
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
动物体细胞体外培养体细胞受体动物
体细胞核
2.原理动物细胞核的全能性注射激活
3.生殖方无性生殖→保持优良性状整(融合
式:卵母细胞供体卵母细胞去核卵母细胞“中中”“华华”;
具有许多与人类相似的生物学
特征的灵长类动物
在体细胞核移植中,非人灵长类动物体细胞核移植非常困难
◎供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复
其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低。
自对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。
我国科学家成功获得了世界上首例体细胞克隆猴。;
克隆技术:是一个很广的概念,凡指新形成的事、物与亲
本一致的现象均可称为“克隆”。
在生物学上,克隆是无性繁殖,具体地说,是指一个共同的祖先,通
过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的分子、细胞或个体。;
(二)体细胞核移植的过程
1997年,美国的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。
思考:依据“多莉羊”的培育过程,如何进行优质奶牛的快速繁育?;
取卵母细胞体外培养至MⅡ期;
采集卵母细胞
MⅡ期去核
去核卵母细胞
将供体细胞注入去核的卵母细胞
细胞融合
重构胚
↓用物理或化学方法激活重构胚
将胚胎移入受体(代孕)动物体内
生出与供体遗传物质基本相同的克隆动物;
(1)为什么选择卵母细胞作为核移植受体细胞る体积大,易操作
目含???促使细胞核表达全能性的物质
?营养物质丰富。;
(1)方法湿微操作去核法
其它:梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。
优点在没有穿透卵母细胞透明带的情
细胞伤害小。
(2)卵母细胞去核的原因?
为了使核移植的胚胎或动物的核遗传
物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。
(3)“去核”实际去的是什么?
是去除纺锤体-染色体复合物;
3供体细胞的选择和培养
(1)供体:提供细胞核的个体;
供体细胞:有重要利用价值的动物
的体细胞。
(2)培养过程中,一般选用传代10代以内的细胞,为什么?
高产奶牛(供体)因为当传代至10-50代左右时。
部分细胞核型可能会发生变化,而10代以内的细胞一般能保
持正常的二倍体核型,保证了
供体细胞正常的遗传基础。
从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)
上取体细胞,进行细胞培养;
(1)将整个供体细胞注入去核卵母细胞的优点?
一保证供体细胞的细胞核不被破
坏,操作方便。
当传递线粒体DNA:
实质是直接将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内
(2)两个细胞发生融合的方法
电融合法--供体核进入卵母细胞,形成重构胚。;
(1)重构胚:
是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完成个体的能力。
(2)如何激活重构胚?
用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+
载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)
激活重构胚胎
(3)激活重构胚目的是?
使其完成细胞分裂和发育过程。;
(1)动物体细胞核移植技术证明了?(原理)已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性
(2)从遗传物质的角度分析,克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?
一克隆动物遗传物质来源
核遗传物质:全部来自供体动物的细胞核质遗传物质:一部分来自供体细 受体卵母细胞
目生物性状赴部贫来景的影响。
克隆动物在个体发育过程中有可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异;
动物细胞融合
胚胎移植
早期胚胎培养;
1.采集的卵母细胞应培养至MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)
2.选择MⅡ期卵母细胞的原因
卵母细胞内卵黄多,营养物质丰富
细胞体积大,易于操作
含有促进细胞核表现
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