枸杞中槲皮素和烟花苷的测定 高效液相色谱法（征求意见稿）.pdfVIP

ICS67.050

B20

团体标准

T/NAIAXXX—2023

枸杞中槲皮素和烟花苷的测定

高效液相色谱法

DeterminationofQuercetinandNicotiflorininLyciumbarbarumL.byHPLC

2023-XX-XX发布2023-XX-XX实施

宁夏化学分析测试协会发布

枸杞中槲皮素和烟花苷的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了枸杞中槲皮素和烟花苷的液相色谱检测方法。

本文件适用于枸杞中槲皮素和烟花苷的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本

文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

NY/T3950植物源性食品中10种黄酮类化合物的测定高效液相色谱-串联质谱法

T/NAIA050枸杞及其制品中二氢槲皮素的测定高效液相色谱法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法提要

试样经甲醇溶液超声提取后，经反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱仪测定

确证，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1甲醇：色谱纯。

5.1.2磷酸：分析纯。

5.1.380%甲醇溶液：将甲醇和水按80+20的体积比混合均匀。

5.2标准品

5.2.1标准品：槲皮素（Quercetin，CAS号117-39-5，CHO）、烟花苷（Nicotiflorin，CAS号

15107

17650-84-9，C27H30O15），纯度均≥99%。

5.2.2标准储备液：分别准确称取槲皮素、烟花苷标准品10mg（准确至0.1mg），于10mL容量瓶

中，用甲醇溶解并定容至刻度，4℃保存。

5.2.3标准混合中间液（1μg/mL）：分别准确吸取槲皮素、烟花苷标准储备液各1.00mL于10mL

容量瓶中，用流动相定容。

5.2.4标准混合使用液：分别吸取标准混合中间液0.50mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、5.00mL于

10mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，配制成质量浓度分别为5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、

40.0μg/mL、50μg/mL的混合标准系列工作液，临用现配。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱仪(HPLC)：带二极管阵列检测器或紫外检测器。

6.2分析天平：感量0.1mg0.01g。

6.3超声波清洗器。

6.4水相型微孔滤膜：孔径0.45μm。

6.5涡旋混合器。

6.6高速冷冻离心机。

7分析步骤

7.1试样制备

取代表性样品研磨均匀分装，密闭常温或冷藏保存。

7.2试样的提取

称取试样5.0g（精确到0.01g）置于25mL容量瓶中，加入80%甲醇溶液20mL，超声提取10min，

取出，放冷，用80%甲醇溶液定容至刻度，混匀，转移至50mL离心管中，4000r/min离心5min，

上清液经0.45μm微孔滤膜过滤后，上机待测。

7.3仪器参考条件

7.3.1色谱柱：C18色谱柱，4.6*250mm，5μm，或性能相当者。

7.3.2流动相：甲醇：0.4%磷酸溶液=50：50。

7.3.3流速：1.0mL/min。

7.3.4检测波长：360nm。

7.3.5进样量：10μL。

7.3.6柱温：25℃。

7.4标准曲线的制作

将标准曲线工