食品中致病菌快速检测方法荧光PCR法.pdfVIP

食品中致病菌快速检测方法荧光PCR法

1范围

本文件规定了食品中沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌、小肠结肠耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、金

黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、创伤弧菌、霍乱弧菌、铜

绿假单胞菌的荧光PCR定性检测方法，包括方法的原理、试剂和耗材、仪器和设备、试样的制备、分

析步骤、验证要求等内容。

本文件适用于食品中沙门氏菌（Salmonellaspp.）、志贺氏菌（Shigellaspp.）、副溶血性弧菌（Vibrio

parahaemolyticus）、小肠结肠耶尔森氏菌（Yersiniaenterocolitica）、空肠弯曲菌（Campylobacterjejuni）、

金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes)、肠出血

性大肠埃希氏菌O157:H7（EscherichiacoliO157:H7）、创伤弧菌（vibriovulnificus）、霍乱弧菌（Vibrio

cholerae）、铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）的荧光PCR快速定性检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验

GB4789.5食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验

GB4789.7食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验

GB4789.8食品安全国家标准食品微生物学检验小肠结肠炎耶尔森氏菌检验

GB4789.9食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验

GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB4789.30食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验

GB4789.36食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验

GB4789.44食品安全国家标准食品微生物学检验创伤弧菌检验

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

SN/T1022进出口食品中霍乱弧菌检验方法

SN/T1870出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法

SN/T2099进出口食品中绿脓杆菌检测方法

SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

荧光PCR法（FluorescencePCRMethod）

3

利用荧光标记的探针，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增目标基因片段并实时检测荧光信号的检测

方法。

CT值（CycleThreshol）

荧光信号达到设定阈值时的循环数，用于判断目标菌的存在。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA：脱氧核糖核酸(DeoxyriboNucleicAcid)

PCR:聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction）

dNTP:脱氧核苷三磷酸（Deoxy-ribonucleosidetriphosphate）

dATP:脱氧腺苷三磷酸（DeoxyadenosineTriphosphate）

dGTP:脱氧鸟苷三磷酸（Deoxyadenosinetriphosphate）

dCTP:去氧胞苷二磷酸（Deoxycytidinediphosphate）

dTTP:脱氧胸苷三磷酸（Deoxythymidinetriphosphate）

dUTP:脱氧尿苷三磷酸（Deoxyuridinetriphosphate）

Tris:三（羟甲基）氨基甲烷（Tris(hydroxyme