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胶体金免疫层析法检测技术操作规程
A1原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的待测物质与胶体金标记的特异性抗体结合,
抑制抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而产生检测线颜色深浅的变化,通过
检测线与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中待测物质进行定性判定。
A2材料及设备
A2.1免疫胶体金快速检测试剂卡:密封包装,干燥阴凉处保存,用前恢复至室温(20℃±5℃),
即开即用。
A2.2电子天平:感量0.01g。
A2.3离心机:转速不低于4000转。
A2.4微量移液器:10μL-200μL。
A2.5胶体金试剂卡读卡仪。
A3测定步骤
A3.1试样制备与储存
抽样后,将样品分为检样和备样各一份,每份不少于100ml(g)。检样立即测试或-20℃
以下冷冻待测,备样-20℃以下冷冻保存,有效期不超过6个月。
A3.2净化(必要时)
若待测样液呈浑浊状态,采取离心机离心(4000转,5分钟)或静置10分钟后,再进
行测定。
A3.3测定
免疫胶体金快速检测试剂卡(A2.1),恢复至室温后,从包装袋中取出,置于水平台
面上。用微量移液器吸取100μL清澈样液,加至免疫胶体金快速检测试剂卡的加样孔中,
在6min-8min内读取检测结果。
A4结果判断
阴性(-):T线显色强于C线显色或与C线显色无明显差异,表示样本中不含有待检
物或浓度低于检测限。
阳性(+):T线显色明显弱于C线显色或T线不显色表示样本中待检物浓度等于或高
于检测限。
无效:未出现C线,表明不正确的操作过程或试纸条已失效。
当出现肉眼无法判断T线与C线的显色差异时,使用胶体金试剂卡读卡仪(5.5)进行
结果判断。
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