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胶体金免疫层析法检测技术操作规程

A1原理

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的待测物质与胶体金标记的特异性抗体结合,

抑制抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而产生检测线颜色深浅的变化,通过

检测线与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中待测物质进行定性判定。

A2材料及设备

A2.1免疫胶体金快速检测试剂卡:密封包装,干燥阴凉处保存,用前恢复至室温(20℃±5℃),

即开即用。

A2.2电子天平:感量0.01g。

A2.3离心机:转速不低于4000转。

A2.4微量移液器:10μL-200μL。

A2.5胶体金试剂卡读卡仪。

A3测定步骤

A3.1试样制备与储存

抽样后,将样品分为检样和备样各一份,每份不少于100ml(g)。检样立即测试或-20℃

以下冷冻待测,备样-20℃以下冷冻保存,有效期不超过6个月。

A3.2净化(必要时)

若待测样液呈浑浊状态,采取离心机离心(4000转,5分钟)或静置10分钟后,再进

行测定。

A3.3测定

免疫胶体金快速检测试剂卡(A2.1),恢复至室温后,从包装袋中取出,置于水平台

面上。用微量移液器吸取100μL清澈样液,加至免疫胶体金快速检测试剂卡的加样孔中,

在6min-8min内读取检测结果。

A4结果判断

阴性(-):T线显色强于C线显色或与C线显色无明显差异,表示样本中不含有待检

物或浓度低于检测限。

阳性(+):T线显色明显弱于C线显色或T线不显色表示样本中待检物浓度等于或高

于检测限。

无效:未出现C线,表明不正确的操作过程或试纸条已失效。

当出现肉眼无法判断T线与C线的显色差异时,使用胶体金试剂卡读卡仪(5.5)进行

结果判断。

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