遗传的物质基础-DNA.pptVIP

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决定双螺旋结构状态的因素:H键碱基堆积力疏水作用力范德华力磷酸基团的静电斥力碱基分子内能三、DNA的变性、复性和杂交变性:NatureDNARandomcoil加热或试剂高温、酸、碱及某些变性剂如尿素、甲酰胺和甲酸等都可导致DNA变性 UreaandformamideformshydrogenbondswiththeDNAbases,“saturating”H-bondsitesandpreventingtheformationofinter-basebonds.熔解曲线增色效应:变性DNA在260nm处光吸收的增加。熔点(Tm):是A260值升高达到极大值一半时的温度复性:DNA双链变性后,互补单链再次聚合的过程。影响复性效率的因素:温度:最佳复性温度为低于Tm约25℃DNA浓度复性时间DNA的复杂程度C0t曲线:C0为变性DNA复性时的初始浓度,以核苷酸的摩尔浓度表示,t为时间,以秒表示。C0t1/2表示复性一半时的C0t值C0tistheproductoftheinitialDNAconcentration(C0)inmolesofnucleotidesperliterandtime(t)inseconds[mol·s·L-1]AlinearrelationshipbetweenDNAcomplexityandC0t1/20102真核生物DNA由于具有重复序列,其C0t曲线往往具有多个拐点:AtverylowC0t,thehighlyrepetitiveDNAanneals,followedbythemoderatelyrepetitiveDNA,andfinallybythesingle-copyDNA.杂交:复性DNA中,如果两条链来源不同,就叫做杂交。SouthernblotNorthernblotWesternblot四、DNA二级结构的多形性A-DNAZ-DNAB-DNA螺旋方向右手左手右手Bp数/匝111210螺距2.84.53.4大沟细、深平伏宽和中等深小沟宽、浅很窄、很深窄和中等深碱基和糖环连接的糖苷键,上方为大沟,下方为小沟。A-DNS,B-DNA和Z-DNA双螺旋的中轴各不相同。Ifweareright,andofcoursethatisnotyetproven,thenitmeansthatnucleicacidsarenotmerelystructurallyimportantbutfunctionallyactivesubstancesindeterminingthebiochemicalactivitiesandspecificcharacteristicsofcellsandthatbymeansofaknownchemicalsubstanceitispossibletoinducepredictableandhereditarychangesincells.Thisissomethingthathaslongbeenthedreamsofgeneticists.Thenucleationphaseofthereactionisasecond-orderprocessdependingonsequencealignmentofthetwostrands.Thisprocesstakesplaceslowlybecauseittakestimeforcomplementarysequencestoencounteroneanotherinsolutionandthenalignthemselvesinregister.Oncethesequencesarealigned,thestrandszipperupquickly.引起DNA双链构象改变有以下因素:①核苷酸顺序;②碱基组成;③盐的种类;④相对湿度超螺旋的两种形态超螺旋的方向松弛的B-DNA,共有420bp,一条链绕另一链42次,正好形成42圈螺旋,则L=T=42,所以W=0,无超螺旋。若固定一端,另一端按顺时针方向旋转6圈,使双螺旋解开6圈,再将双链连接成闭合环,

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