萘酰亚胺类荧光探针在斑块泡沫细胞中巯基蛋白质亚硝基化及其与ONOO-互作的成像研究.pdf

山东师范大学硕士学位论文

目录

摘要I

AbstractIII

第一章绪论1

1.1动脉粥样硬化（AS）简介1

1.2AS中巨噬细胞源泡沫化的形成过程5

1.3巯基蛋白质亚硝基化及ONOO对AS的影响6-

1.4巯基蛋白质亚硝基化的研究现状7

1.4.1苯磺酸盐探针7

1.4.2生物素开关技术9

1.4.3纳米金（AuNPs）探针10

1.4.4有机膦荧光探针10

1.5检测ONOO的研究现状13-

1.5.1ONOO的荧光探针研究现状13-

1.5.2ONOO-及其他分析物的研究进展17

1.6本论文研究内容与设计思路22

第二章溶酶体靶向荧光探针用于AS泡沫化过程中巯基蛋白质亚硝基化动态监测24

2.1引言24

2.2实验部分25

2.2.1试剂与仪器25

2.2.2探针Lys-PSNO的合成步骤27

2.2.3测试溶液的配制29

2.2.4探针Lys-PSNO光物理性质的测试29

2.2.5Lys-SNOGSNO30

探针对的选择性实验

2.2.6细胞实验30

2.2.7蛋白质免疫印迹实验31

2.2.8探针Lys-PSNO对ApoE−/−小鼠血管内巯基蛋白质亚硝基化荧光成像32

I

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2.3结果与讨论32

2.3.1Lys-PSNO的设计策略32

2.3.2Lys-PSNO检测机理验证33

2.3.3Lys-PSNO紫外-可见吸收光谱34

2.3.4探针Lys-PSNO的反应动力学34

2.3.5探针Lys-PSNO的荧光光谱35

2.3.6探针Lys-PSNO选择性实验36

2.3.7pH对探针Lys-PSNO的影响36

2.3.8细胞实验37

2.3.9巯基蛋白质亚硝基化对AS泡沫化过程中溶酶体功能的调控机制39

2.3.10探针Lys-PSNO对小鼠血管内巯基蛋白质亚硝基化的荧光成像40

2.4小结42

第三章AS泡沫化过程中巯基蛋白质亚硝基化与ONOO互作的荧光成像研究43-

3.1引言43

3.2实验部分45

3.2.1试剂与仪器45

3.2.2探针的合成与表征46

3.2.3待测液的配制48

3.2.4探针的光物理性质测试48

3.2.5探针的选择性实验49

3.2.6细胞实验50

3.3结果与讨论50

3.3.1C-ONOO检测ONOO-机理的验证50

3.3.2探针紫外-可见吸收光谱51

3.3.3探针荧光光谱52

3.3.4探针的选择