一种低分子肝素分子量及分子量分布检测方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN106442799A

(43)申请公布日2017.02.22

(21)申请号CN201610979330.9

(22)申请日2016.11.04

(71)申请人深圳市天道医药有限公司

地址518052广东省深圳市高新中一道19号

(72)发明人李建科周洋石瑛王景文胡默青

(74)专利代理机构北京华科联合专利事务所(普通合伙)

代理人王为

(51)Int.CI

G01N30/02

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种低分子肝素分子量及分子量分

布检测方法

(57)摘要

本发明涉及一种低分子肝素分子量

及分子量分布检测方法，采用高效液相色

谱法，所述方法步骤如下：步骤1，低分

子肝素钠标准品溶液的配制：步骤2，低

分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制：

步骤3，供试品溶液的配制：步骤4，

0.01％叠氮钠溶液配制：步骤5，将上述

0.01％叠氮钠溶液，低分子肝素钠标准品

溶液，低分子肝素钠分子量校准标准溶液

以及供试品溶液分别注入高效液相色谱

仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品

的分子量和得出分子量分布结果。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种低分子肝素分子量及分子量分布检测方法,采用高效液相色谱法,所述方法步

骤如下:

步骤1,低分子肝素钠标准品溶液的配制:

步骤2,低分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制:

步骤3,供试品溶液的配制:

步骤4,0.01%叠氮钠溶液配制:

步骤5,将上述0.01%叠氮钠溶液,低分子肝素钠标准品溶液,低分子肝素钠分子量校

准标准溶液以及供试品溶液分别注入高效液相色谱仪,得到色谱图,根据色谱图计算

供试品的分子量和得出分子量分布结果。

2.根据权利要求1所述的检测方法,所述方法步骤如下:

步骤1,低分子肝素钠标准品溶液的配制:称取低分子肝素钠标准品约18-22mg,加入

流动相溶解成8-12mg/ml的标准溶液,一次性0.2-0.24um过滤膜过滤到样品瓶中,贴

好标识,将标准溶液用封口膜封口,冷冻保存,使用前取出平衡至室温并混匀再使用,

步骤2,低分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制:称取低分子肝素钠分子量校准标

准品8-12mg,加入已过滤的流动相溶解成8-12mg/ml的校准溶液,将校准溶液分装到

若干个内插管中,每支装入145-155ul,将分装好的溶液用封口膜封口,冷冻保存,使用

前取出平衡至室温并混匀再使用,

步骤3,供试品溶液的配制:称取样品18-22mg,加入流动相溶解成8-12mg/ml的样品

溶液,一次性0.2-0.24um过滤膜过滤到样品瓶中,贴好标识,

步骤4,0.008-0.012%叠氮钠溶液配制:称取叠氮钠48-52mg于480-520mL容量瓶中,

加流动相溶解定容,摇匀即得,

步骤5,将上述0.008-0.012%叠氮钠溶液,低分子肝素钠标准品溶液,低分子肝素钠分

子量校准标准溶液以及供试品溶液分别注入高效液相色谱仪,得到色谱图,根据色谱

图计算供试品的分子量和得出分子量分布结果,

其中所述高效液相色谱的色谱条件如下:

流动相:25~75mM醋酸铵溶液

洗脱方式:等度洗脱。

3.根据权利要求1所述的检测方法,所述方法步骤如下:

步骤1,低分子肝素钠标准品溶液的配制:称取低分子肝素钠标准品约20mg,加入流

动相溶解成10mg/ml的标准溶液,一次性0.22um过滤膜过滤到样品瓶中,贴好标识,

将标准溶液用封口膜封口,冷冻保存,使用前取出平衡至室温并混匀再使用,

步骤2,低分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制:称取低分子肝素钠分子量校准标

准品10mg,加入已过滤的流动相溶解成10mg/ml的校准溶液,将校准溶液分装到若

干