显色反应检测总蛋白.docxVIP

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第一部分:显色反应检测总蛋白

1范围

本文件规定了生产过程中过敏原总蛋白的快速检测方法。

本部分适用于食品生产过程中表面上和溶液中蛋白质残留的快速检测。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4技术要求

4.1方法提要

使用Clean-TraceTM表面过敏原采样棒，在目标区域表面涂抹约10cm×10cm的区域或浸入液体样品。将采样后的采样棒放回装置管内，随后将手柄压入并抓住手柄侧快速摇晃，接着将采样棒插入预热至55℃的加热模块内15分钟，采样到的蛋白质肽键在碱性条件下与铜离子（Cu2+）形成络合物，并被还原成Cu+，随后与二喹啉甲酸（BCA）形成紫色络合物。通过观察该颜色变化判断样品中的蛋白质含量，进而推断出是否存在蛋白质残留。

4.2设备和材料

恒温装置：55℃±1℃;

加热模块。

4.3试剂

保湿液；

Clean-TraceTM表面过敏原采样棒。

5实验方法

5.1实验准备

打开恒温装置并设置到55℃。

将Clean-TraceTM表面过敏原采样棒置于室温下至少10分钟。

5.2表面涂抹采样

抓住采样棒手柄从装置管中取出采样棒。如果采样表面干燥，则在涂抹前向采样表面或采样棒上加4滴保湿液。

使用采样棒涂抹大约10cm×10cm的区域。先顺着一个方向往复涂抹，完成后将涂抹方向旋转90度后再次涂抹。涂抹过程，需在采样棒上施加压力，采样的同时要旋转采样棒。

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5.3液体采样

抓住采样棒手柄从装置管中取出采样棒，将采样头浸入样品，随后在管壁挤压出多余的液体。

5.3激活和孵育

将采样棒重新插回装置，用力向下按压Clean-TraceTM表面过敏原采样棒的手柄顶端，在按压完成后，手柄顶端应与装置管顶端持平。抓紧装置管顶端，在保持装置管垂直的情况下左右快速摇晃混匀5秒钟，溶液将变为薄荷绿色。

将Clean-TraceTM表面过敏原采样棒置于预热至55℃的加热模块内加热15分钟。

6结果判定

加热完毕后，立刻取出，并将涂抹棒的溶液颜色与采样棒上的标签进行对比。记录最明显的颜色变化作为结果，判断残留的蛋白质水平和表面清洁度：

绿色为合格结果，无需进一步操作；

灰色为无效结果，建议重新清洁并重新检测；

紫色为不合格结果，需要重新清洁并重新检测。

4

附录A

（资料性）

Clean-TraceTM表面过敏原采样棒操作示意图

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附录B

（资料性）

部分过敏原检测限值及其蛋白质含量

过敏原检测限值

所用物质

蛋白质含量(%)

鸡蛋10-20μg

NISTSRM8415全蛋粉

30

牛奶10-20μg

NISTSRM8435全脂奶粉

25.9

花生25-50μg

NISTSRM2387花生酱

22.2

麸质40μg

高筋粉（本地采购）

~83

大豆20-40μg

大豆粉（本地采购）

~46.5

杏仁20-40μg

完整杏仁（本地采购）

~19.5

荞麦20-40μg

荞麦粉（本地采购）

~13

Clean-TraceTM表面过敏原采样棒可用于检测表面上和溶液中的蛋白质残留，从而确定清洁是否已有效消除蛋白质，包括潜在过敏性蛋白质。然而，结果判读将根据具体应用而有所不同，因此建议用户验证适于其具体要求的方法。

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附录C

（资料性）

Clean-TraceTM表面过敏原采样棒使用注意事项

如何充分利用Clean-TraceTM表面过敏原采样棒

正确

不正确

启动时以垂直位置握持Clean-TraceTM表面过敏原采样棒并

从一侧到另一侧快速摇晃至少5秒钟。

不在垂直位置启动时，请勿上下晃动，不要剧烈摇晃。

垂直培养Clean-TraceTM表面过敏原采样棒。

水平培养Clean-TraceTM表面过敏原采样棒。

15分钟时读取Clean-TraceTM表面过敏原采样棒。

记录15分钟后的任何颜色变化。