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黑豆皮多酚提取物抗氧化活性研究

任曼妮;王存堂;唐旭华;孙鹏;高曾明

【期刊名称】《《食品与机械》》

【年(卷),期】2019(035)010

【总页数】4页(P189-192)

【关键词】黑豆皮;总酚;总黄酮;抗氧化活性

【作者】任曼妮;王存堂;唐旭华;孙鹏;高曾明

【作者单位】齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

【正文语种】中文

黑豆是一年生草本豆科植物，原产于中国东北三省、安徽、河南、河北、山东等。其形状多呈扁圆、长椭圆形或肾状形。黑豆作为药食两用物质，历史久远[1]。黑豆营养物质丰富，被誉为“植物蛋白之王”[2]。此外，黑豆还富含植物活性物质，具有比其他可食用豆类更高的酚类物质和抗氧化性[3]，且这些酚类物质多集中在黑豆皮中[4]。

Xu等[5]通过HPLC从黑豆中分析出12种异黄酮类化合物；Feng等[6]通过HPLC从黑豆中鉴定出4种异黄酮；Lee等[7]分析了黑豆中花青素的组成。研究[5,8]表明，黑豆皮所富含的酚类化合物使得黑豆比其他豆类具有更高的自由基清除能力和总抗氧化能力。黑豆皮中的酚类物质具有很多生物活性，如抗辐射、抗氧化、抗脂肪和降血脂、降血糖、促进伤口愈合、抗炎等。Kwon等[9]通过高脂肪喂养小鼠，表明黑豆皮提取物可以转变高脂肪饮食对体重、血清脂质的影响；Wang等[10]通过建立高血糖小鼠模型，证明了黑豆皮提取物具有改善氧化应激诱导的小鼠高血糖症状。此外，Nizamutdinova等[11]发现黑豆皮提取物对伤口愈合有促进作用。

试验拟以黑豆皮为原料，分别利用体积分数70%的甲醇、乙醇和丙酮作为提取溶剂进行多酚类物质提取，测定提取物中总酚、总黄酮含量及抗氧化活性，为黑豆营养功能的深度开发提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与仪器

1.1.1材料与试剂

黑豆皮：市售，粉碎，过80目筛备用；

ABTS、DPPH：分析纯，美国Sigma-Aldrich化学试剂公司；

没食子酸标准品、芦丁标准品、Folin-酚试剂、2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)、碳酸钠、丙酮、甲醇、乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸亚铁、铁氰化钾、三氯乙酸、三氯化铁：分析纯，天津凯通化学试剂公司。

1.1.2仪器与设备

电子分析天平：ME204型，梅特勒—托利多仪器(上海)有限公司；

高速万能粉碎机：FW100型，天津市泰斯特仪器有限公司；

紫外—可见分光光度计：UV-5100型，上海元析仪器有限公司；

高速离心机：LG10-24A型，北京京立离心机有限公司；

数显恒温水浴锅：HH-6型，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司；

旋转蒸发仪：RE-200A型，上海亚荣生化仪器厂；

真空冷冻干燥机：LGJ-25C型，北京四环科学仪器厂有限公司。

1.2方法

1.2.1黑豆皮多酚类物质的提取称取0.5g黑豆皮粉，分别用20mL体积分数为70%的乙醇、甲醇、丙酮避光震动提取20min，6000r/min离心10min，取上清液。沉淀用同样的方法再次提取，合并两次所得上清液，50℃真空下浓缩2h，再转至-40℃真空干燥48h。粉末于-20℃密封储存备用。按式(1)计算多酚物质得率。

(1)

式中：

c——多酚物质得率，g/100g；

m1——提取物干粉质量，g；

m2——黑豆皮干粉质量，g。

1.2.2总酚含量测定采用福林酚法，参考Xue等[12]方法并稍作修改。取0.15mL提取液稀释至0.1mg/mL，于10mL具塞比色管中，加入10倍稀释的0.2mol/L福林酚试剂，利用涡旋混匀器混匀，静置5min。然后加入6%(体积分数)Na2CO3溶液1.5mL，将此混合液于75℃下水浴10min，随后立即冰浴终止反应，用蒸馏水定容至刻度。于725nm处测定反应液吸光值。同时以0.15mL甲醇代替提取液作空白对照，配置不同浓度梯度没食子酸标准品制作标准曲线(y=0.031x+0.013，R2=0.998)。总酚含量以每克黑豆皮提取物干基中所含没食子酸当量的毫克数表示，重复测定3次。

1.2.3总黄酮含量测定参考Zhang等[13]的三氯化铝分光光度法略加改动。取1mL提取液稀释至0.1mg/mL，于10mL具塞比色管中，加入5g/LNaNO2溶液0.3mL摇匀，静置6min后再加入10g/LAlCl3·6H2O溶液0.3mL，静置6min。加入10%(质量分数)NaOH溶液4.0mL，用蒸馏水定容，静置15min，于510nm下测其吸光值。同时以1mL甲醇代替提取液作空白对照，配置不同浓度梯度芦丁标准品制作标准曲线(y=1.016x-0.012，R2=0.998)，总黄酮含量以每克黑