DB34T 1376-2011 鸡蛋中氟苯尼考的残留测定-高效液相色谱法　.docxVIP

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DB34

安徽省地方标准DB34/T1376—2011

鸡蛋中氟苯尼考的残留测定—高效液相色谱法

DeterminationofflorfenicolresiduesineggsbyHPLCmethod

2011-03-16发布2011-04-16实施

安徽省质量技术监督局发布

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DB34/T1376—2011

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省畜牧兽医局提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。本标准主要起草人：李珲、许世富、汤春莲、陶小平、丁作坤、陈文帮。

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DB34/T1376—2011

鸡蛋中氟苯尼考的残留测定—高效液相色谱法

1范围

本标准规定了鸡蛋中氟苯尼考检验的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。本标准适用于鸡蛋中氟苯尼考残留的定量检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样

3试样制备

按GB/T14699.1抽取有代表性的不少于500g的鸡蛋样品，经匀浆后装入磨口瓶中在-18℃冰箱保存备用。

4原理

试样中残留的氟苯尼考经乙酸乙酯提取，正己烷脱脂，高效液相色谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水。5.1氟苯尼考标准品：纯度≥98％。

5.2甲醇：色谱纯。5.3乙酸乙酯。

5.4正己烷。

5.5氢氧化铵：25％～28％。

5.6无水硫酸钠：经300℃灼烧4h，置于干燥器中备用。5.7流动相：甲醇：水（40：60）。

5.8聚丙烯离心管：50mL，1.5mL。5.9比色管：50mL，具塞。

5.10梨形瓶：25mL。

5.11滤膜：0.45μm，无机相。

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DB34/T1376—2011

5.12氟苯尼考标准储备液（1mg/mL）：准确称取氟苯尼考标准品100mg，用甲醇稀释至100mL，摇匀，-18℃保存，有效期90d。

5.13氟苯尼考工作液（10μg/mL）：准确移取（5.12）中氟苯尼考标准储备液1.0mL，用甲醇稀释配制成100mL，摇匀，-4℃保存，有效期30d。

5.14氟苯尼考标准溶液：取氟苯尼考工作液（5.13）适量，分别用流动相（5.7）稀释为0、20、50、

100、200、400ng/mL的标准溶液，摇匀，4℃保存，有效期7d。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱仪，配置二极管阵列检测器或紫外检测器。6.2离心机，转速不低于4000r/min。

6.3振荡器。

6.4涡旋混合器。

6.5分析天平：感量0.0001g，0.01g。6.6超声波清洗器。

6.7组织匀浆机。6.8旋转蒸发仪。

7测定步骤

7.1试样提取

称取均质后的试样5g（精确至0.01g），置于50mL聚丙烯离心管中，依次加入30mL乙酸乙酯（5.3），0.9mL氢氧化铵（5.5），5g无水硫酸钠，振荡提取30s，以4000r/min离心5min，上清液转移至50mL比色管中，用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀后取10mL乙酸乙酯提取液到25mL梨形瓶中，45℃水浴中旋转浓缩至干。

7.2试样净化

梨形瓶中的残渣用3mL水溶解，超声5min，加入3mL正己烷（5.4）涡旋混合30s，静置分层，弃掉上层的正己烷，再加3mL正己烷（5.4）涡旋混合30s，静置分层，移取1mL水相于1.5mL的聚丙烯离心管中，以8000r/min离心5min，经0.45μm滤膜过滤，供高效液相色谱仪分析。

7.3色谱测定

色谱柱：C18(4.6×250mm，5μm)，或相当者。柱温：40℃。

进样体积：20μL。流速：1.0mL/min。检测波长：365nm。

流动相：甲醇-水（40：60）。

7.4上机测定