NY_T 3285-2018 播娘蒿对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程.docxVIP

ICS65.100B17

NY

中华人民共和国农业行业标准

NY/T3285—2018

播娘蒿对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程

GuidelineforthedetectionofDescurainiasophia(L.)WebbexPrantltarget-siteresistancetoacetolactatesynthaseinhibitingherbicides

2018-07-27发布2018-12-01实施

中华人民共和国农业农村部发布

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NY/T3285—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院植物保护研究所。

本标准主要起草人：崔海兰、李香菊、于惠林、魏守辉、黄兆峰、李丹。

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NY/T3285—2018

播娘蒿对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程

1范围

本标准规定了播娘蒿[Descurainiasophia(L)WebbexPrantl]对乙酰乳酸合成酶(acetolactatesynthase,ALS)抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程的检测程序、结果分析及注意事项。

本规程适用于播娘蒿对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂产生靶标抗性的有关检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必术可少的。凡是注日期的引用文件，彼注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版木包括所有的修改单)适用于本文伴。

NY/T1667农药登记管理术语

NY/T1859.4农药抗性风险评估第4部分：乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂抗性风险评估

3术语和定义

NY/T1667、NY/TL1859.4中界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

靶标抗性target-siteresistance

由于除草剂作用靶标基因发生改变面导致的抗药性，包括靶标基因突变、靶标基因过量表达。

3.2

非靶标抗性nontarget-siteresistance

杂草对除草剂的吸收传导、代谢解毒能力的变化而导致的抗药性

3.3

整株生物测定法wholeplantbioassay

通过整株杂草生物量对除草剂系列剂量梯度的度应，建立除草剂剂量与杂草生物量的关系，以杂草地上部生物量受除草剂的抑制程度来评价其对除草剂敏感性的方法。

3.4

生长抑制中量herbicideraterequiredfor50%growthreduction(GRs?)

使杂草生物量降低50%的除草剂剂量。

3.5

抗性指数resistanceindex(RI)

除草剂对杂草疑似抗药性种群与敏感种群的生长抑制中量的比值。

3.6

靶标基因突变target-sitegenemutation

由于靶标基因DNA分子中碱基对的取代，导致mRNA的某一密码子发生变化，从而引起编码的氨基酸变成另一种氨基酸，最终导致靶标酶多肽链中的氨基酸序列发生改变。

4检测程序

4.1种子采集

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NY/T3285—2018

当播娘蒿种子成熟时，在疑似发生抗药性的田块采集种子。采样田块应具有代表性，面积不小于

667m2,成熟种子量不少于2000粒。

及时晾干采集的种子，装入种子保存罐，置于阴凉干燥处保存。

4.2材料培养

选择无播娘蒿种子、无除草剂残留的农田地表土，混合20%～30%的草炭土，混合均匀后装入直径不小于10cm的培养钵；待测种群及敏感对照种子用0.05%～0.1%的赤霉素溶液浸泡12h～24h后冲洗干净，均匀撒播在土壤表面，覆土0.2cm～0.5cm,采用盆钵底部渗灌方式补充水分，置于15℃~25℃,光照时间8h～10h条件下培养。待播娘蒿长至2叶期，间苗，每盆保留长势一致的10个植株。

4.3生物测定

4.3.1单剂量甄别法

待植株长至3叶期，用待测除草剂(ALS抑制剂类除草剂)进行茎叶喷雾处理，除草剂剂量采用敏感种群的最低致死剂量，每个处理不少于4次重复，每个重复30株。用药21d后，调查存活株数，按式

(1)计算株防效(%)。

…………

…………

(1)

式中：

E——存活植株数占总处理植株数的百分比，单位为百分率(%);

NL——处理后存活植株数，单位为株；NT——处理植株总数，单位为株。

4.3.2剂量反应曲线法

经单剂量甄别法检测而明确有抗性的植株，进行繁殖，获得的种子用剂量反应曲