5.4 原核生物的转录起始-RNA聚合酶之核心酶.pdfVIP

原核生物的转录起始

-RNA聚合酶之核心酶

罗杰

华中农业大学

αfactor；

•CoreE的组建α+α→2α+β→+β’

•αCTD保证RNApol.结合于Upelement

模板链CAP-cAMP位点，进行正调控

CAP-cAMP

Upelement

βfactor；

★促进RNApol.+NTP→RNAelongation

★完成NMP之间的磷酸酯键的连接

★Editing

★与Rho(ρ)因子竞争RNA3’-end，完成合成终止

★构成Holoenzyme后，β因子含有两个位点

Isite(RifS);识别位点，专一性地结合ATPorGTP

要求高浓度的ATPorGTP！！

Esite(RifR);延伸位点，对NTP非专一性结合

β’factor；

★强碱性亚基

★保证RNApol与Non-template

（sensestrand）的结合

★受K酶抑制

全酶Holoenzyme含有五个功能位点

★sensestrandDNAbindingpoint(β’)

★DNA/RNAhybridsite(β)

★D.S.DNAunwindingpoint(α)

★D.S.DNArewindingpoint(α)

★σfactorpoint

EnzymeMovement

DNAcodingstrand(β’)

Rewindingpoint(α)Unwindingpoint(α)

Isite(RifS);专一性地结合ATPorGTP

Esite(RifR);10-17bp

非专一性结合NTP

解链区

IEDNAtemplatestrand

RNAbindingsite(β)RNA/DNAhybrid(β)

利福平(Rifampin)抗性位点

的鉴定

在尿素电泳缓冲液中纯化

E.coliRNApol.的单个亚基

(AlfredheilZiling1970)

分离与重建RNApol.

重建RNApol.

RifS

RifR

Theβsubunitisobviously

RSR

RifdeterminantofRiforRif