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H19通过干扰hnRNPU-actin复合物抑制RNA聚合酶介导的转录的开题报告

一、研究背景及意义

转录是生物体内重要的基因表达过程，是在DNA模板上，由RNA聚合酶（RNApolymerase）依据基因序列合成RNA分子的过程。RNA聚合酶可以与其他蛋白质形成复合物，从而调节基因转录。

hnRNPU是一种核糖核酸结合蛋白，它与肌动蛋白（actin）能够形成复合物。这个复合物参与调节新生RNA的剪切和加工，因此对于基因转录调控有着重要作用。近年来的研究表明，hnRNPU-actin复合物在某些肿瘤中可能起着促进作用。

H19是一种位于人类基因组的非编码RNA，被认为是一个重要的肿瘤抑制因子。近期的研究表明，H19能够通过干扰hnRNPU-actin复合物来抑制RNA聚合酶介导的转录，从而发挥其肿瘤抑制作用。因此，研究H19干扰hnRNPU-actin复合物的作用机制，对于揭示H19的生物学功能，探究肿瘤发生与发展的机理，具有重要的理论意义和实际意义。

二、研究内容及方法

本研究的主要内容是探究H19在抑制RNA聚合酶介导的转录中的作用机制，并对其作用过程进行详细分析。主要采取以下方法：

1.文献调研：通过查阅相关文献，了解H19在细胞转录调控中的作用机制，以及hnRNPU-actin复合物在此过程中的作用。

2.细胞培养：选择适合的细胞系进行培养，如Hela、HEK293等，并对不同时间点及处理条件下细胞的生长情况和RNA表达水平进行检测。

3.蛋白质表达和纯化：通过基因克隆和表达，获得hnRNPU-actin复合物和H19，利用蛋白质纯化方法获得纯化的复合物和RNA。

4.生物化学实验：检测H19与hnRNPU-actin复合物的相互作用及其对RNA聚合酶介导的转录的影响，包括原位杂交、电泳迁移实验、共沉淀实验等。

5.细胞实验：在细胞中高表达H19或降低hnRNPU-actin复合物的表达，检测RNA表达水平的变化，进一步探究H19与hnRNPU-actin复合物在某些生理和病理状态下的作用机制。

三、研究预期成果

本研究预期通过对H19与hnRNPU-actin复合物相互作用的研究，探究H19的生物学功能及其在肿瘤发生与发展中的作用机制，为阐明RNA聚合酶介导的转录调控机制提供新的认识与理论依据，并为进一步研究开发相关的药物提供有价值的信息。