研究生分子医学实验技能实验二.pdfVIP

  1. 1、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多

生化与分子生物学技术

生化与分子生物学技术

研究生分子医学实验技能实验二

质粒DNA提取原理与方法、实验操作

质粒DNA提取原理与方法、实验操作

作纯化的质粒DNA20μl)

纯化的质粒DNA20μl)

程9月23日

10μl)酶切操作、保温1-3h)

10μl)酶切操作、保温1-3h)

琼脂糖凝胶板的制备

琼脂糖凝胶板的制备

9月30日

质粒DNA及酶切产物电泳(约1h)

质粒及酶切产物电泳(约)

DNA1hDNA的紫外分光光度法定量测定

琼脂糖凝胶电泳结果观察

琼脂糖凝胶电泳结果观察

结果分析与问题讨论

结果分析与问题讨论

研究生分子医学实验技能实验二

实验三:DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验三:DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验四:DNA的紫外分光光度法定量测定

实验四:的紫外分光光度法定量测定

DNA

研究生分子医学实验技能实验二

实验三

DNA的琼脂糖凝胶电泳

DNA的琼脂糖凝胶电泳

研究生分子医学实验技能实验二

琼脂糖凝胶电泳法

凝胶电泳是分离和纯化DNA片段最常用的技术。根据制

备凝胶的材料:

琼脂糖电泳

凝胶

电泳

聚丙烯酰胺电泳

研究生分子医学实验技能实验二

一、琼脂糖凝胶电泳的功用

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。

该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离

心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料

溴化乙啶(Ethidiumbromide,EB)染色,在紫外光下至少可以

检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的

位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,

用于以后的克隆操作。

研究生分子医学实验技能实验二

二、实验原理:

在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,

磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。

采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作

用下,使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大

的差异,从而达到分离核酸片段检测其大小的目的。核酸

分子中嵌入荧光染料(如EB)后,在紫外灯下可观察到

核酸片段所在的位置。

研究生分子医学实验技能实验二

三、琼脂糖电泳分离DNA的范围

琼脂糖可以形成各种形状、大小的孔隙度。琼脂糖凝

胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分

离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平

装置在强度和方向恒定的电场下电泳。

研究生分子医学实验技能实验二

四、电泳指示剂:

核酸电泳常用的指示剂有两种,溴酚蓝(

文档评论(0)

+ 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档