河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(147) .pdfVIP

河南农业大学考研专业课《现代分子生物

学》

课程试卷（含答案）

__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试

考试时间：90分钟年级专业_____________

学号_____________姓名_____________

1、分析题（5分，每题5分）

1.现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因，并构建

该基因的重组表达质粒pET28aA，并在大肠杆菌BL21中进行表达。[宁

波大学2019研]

答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：

①将组织在液氮中会磨碎，每50～100mg组织加入1mlTRIzol

裂解液溶解样品，充分吹打混匀。

②每1mlTRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置

5min。

③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要包括集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中，加入等体积环氧，室温放置

10min。

⑤4℃，10000g离心10min，此时可在离心管底部观察到红色

沉淀，即为RNA。

⑥用75冷的乙醇洗涤结晶，4℃，7500g以下，离心5min，弃

上清。

⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。

（2）检测RNA质量的方法如下：

①凝胶成像：取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖凝胶

电泳，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在18S条

带的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测：使用热辐射分光光度计检测RNA样品在260nm、

280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯

度良好，蛋白质氨基酸等其他物质的污染可以接受。

解析：

2、判断题（55分，每题5分）

1.癌细胞生长旺盛，因而内质网特别发达。（）

答案：正确

解析：内质网是细胞内除核酸以外的一系列重要的生物大分子，如蛋

白质、脂类（如甘油三酯）和糖类合成的基地。癌细胞生长旺盛，必

须大量的蛋白质、脂质、糖类等，因而内质网特别发展缓慢。

2.tRNA转录后加工中有剪接反应，它是由蛋白质催化的。（）

答案：错误

解析：原核生物tRNA基因的转录产物为tRNA前体，通过加工形成

成熟的tRNA，其加工过程包括：①由核酸内切酶切断tRNA两端；②

核酸外切酶从5′端逐个切去附加序列；③在3′端加上CCAOH结构；

④碱基的修饰反应。

3.尼龙膜是核酸杂交的一种固体支持物，具有同DNA结合能力强韧

性强，可反复洗脱运用，并且杂交信号本底低。（）

答案：错误

解析：尼龙膜是核酸杂交的一种固体气态支持物，有同DNA结合能力

强、韧性强，可反复洗脱使用，并且杂交信号本底低等优点，但是成

本高。

4.永生化细胞和癌细胞的主要共同点就是既没有细胞分裂次数的限

制，也没有细胞间的接触抑制。（）

答案：错误

解析：癌细胞与永生化细胞抗体具有本质的差异，永生化细胞并未激

活新的细胞特性或抑制现有的细胞特性，而仅是保护正常的特性不能

消失，因而基本上不改变细胞扭曲的性质；“癌化”是通过激活致癌

基因或抑制抑癌基因而实现，这种方式创造的“永生化”在很大程度

上已经改变细胞的类型。

5.蛋白质分子中个别氨基酸的取代必然会导致生物活性的改变。

（）

答案：错误

解析：与蛋白质功能的氨基酸的改变不会引起蛋白质功能的改变，与

蛋白质功能关系不大的氨基酸的改变只会使蛋白质功能有所，与蛋白

质功能直接相关的氨基酸而令改变会的蛋白质功能下降或改变。

6.色氨酸操纵子通过启动子操纵区系统受到阻遏蛋白的调控属于正

调控。（）

答案：错误

解析：色氨酸操纵子通过启动子操纵区系统受到阻遏蛋白的