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rHDL的起源，制备及用途

摘要：HDL即高密度脂蛋白，为血清蛋白之一。由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，作为动脉

硬化预防因子而受到重视。人们设想通过注射HDL治疗新血管疾病，于是研究人工重组制备HDL。

apoA-I有人源的和基因工程来源的，重组方法有超声法和脱氧胆酸钠法两种。现在，人们又研究

出具有不同功能的rHDL,如通过连接突变型apoA-I中和内毒素，通过载上药物进行靶向治疗，通

过荧光标记诊断疾病。未来，rHDL将会有更广泛的应用。

关键词：rHDL心脑血管疾病临床应用

正文：

rHDL,即人工重组高密度脂蛋白，是将载脂蛋白A-I和卵磷酯按照一定比例重组形成复合物，

通过生化手段模拟HDL，使其具有与人体自身的高密度脂蛋白高度相似的生物特性和行为特征。

由于其众多的生物学功能在医药方面拥有极大的应用潜力，因而越来越受到人们关注。本文将从

rHDL的起源，制备及用途等方面进行介绍。

1.HDL与rHDL

1.1HDL代谢理论

HDL（highdensitylipoprotein）即高密度脂蛋白,为血清蛋白之一。HDL由载脂蛋白

A-I(ApolipoproteinA-I,apoA-I)、卵磷脂、胆固醇等组成，在血清中的含量约为300mg／dl。

其蛋白质部分，A－Ⅰ约为75％，A－Ⅱ约为20％，所以亦称为a1脂蛋白。它是所

体积最小，密度最高的脂蛋白,由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以

因子而受到重视,俗称“血管清道夫”。

1975年，Miller博士和他的研究小组，发现了八例冠心病患者血脂水平都在正常范围

患上了严重的冠心病；同时又发现，这八例患者都HDL有偏低的特点。它说明了冠心病并不都

由高血脂引发，HDL水平的降低也可能是冠心病的一个重要的甚至是关键性的发病原因。

1985年，美国的布朗和古斯坦因博士以全新的角度阐述了脂蛋白代谢的机理：

（HDL）能够驱动胆固醇逆转运，通过逆转运作用把血液和组织中多余的胆固醇等“血液垃圾”携

带经肝脏分解逆向排除体外，同时HDL具有逆转内皮功能不良、刺激前列环素生成、抑制内皮细

胞凋亡、减少血小板聚集、抑制LDL氧化等许多功能。HDL代谢理论的发现，就是世界医学史上

的一颗原子弹，甚至有人说谁能大幅度升高HDL，谁就解决了冠心病甚至是整个心脑血管疾病的

问题，谁就能把人类的寿命从理论上延长几十年。

1.2rHDL的产生

人们设想采取注射HDL的方式来提升人体HDL水平，然而天然HDL需要从血液中提取获得，

大规模的制备具有一定的难度。同时，生物安全性问题以及提取的代价过高也限制了天然HDL

作为药物的发展潜力。重组HDL（reconstitutedHDL，rHDL）由内源性分离或体外合成的apoA-

Ⅰ与磷脂酰胆碱在体外重组形成，在生化特性和功能上与内源性HDL类似，拥有天然HDL多种

特性。

早在1985年，就有莫斯科的科学家们报告说,他们合成了一种具有与天然HDL相似物理化学特

性的脱辅基蛋白A-1/卵磷脂/胆固醇复合物,它具有抗人类动脉粥样硬化形成的作用并可能作为从

动脉壁去除胆固醇的一种清除剂。用从人主动脉粥样硬化病变的脂肪条和斑块提取出来的酶处理

培养平滑肌细胞的研究中,天然的HDL和合成的复合物都能明显降低培养细胞中胆固醇酯的水平。

〔1〕

2.rHDL的制备

2.1原料来源

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rHDL的制备主要原料为载脂蛋白A-I和卵磷酯。其中，卵磷脂较容易获得，既可以购买大豆卵

磷脂，也可以从新鲜鸡蛋中提取蛋黄卵磷脂。相反，apoA-I的来源是解决影响rHDL工业化生产的

一个重要因素。apoA-I可分别从人血浆、组分FⅣ分离提取到人源apoA-I和利用基因工程制备

apoA-I。

人源apoA-Ⅰ的制备方法一般依赖高速离心机，即高速离心形成密度梯度得到粗HDL,再进一

步纯化得apoA-Ⅰ。其他的如Scanu等采用离子交换柱法，JacquelineAR等采用SephadexG-200

和Sepharose6B色谱层析法,Sherman等采用疏水层析法，王克勤等采用大柱电泳法，Burstein

等采用金属离子法，陈宝生等采用层析聚焦法来提取人血浆中apoA-Ⅰ。此