猪巨细胞病毒gB基因克隆、原核表达及抗血清的制备的中期报告.docxVIP

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2023-11-05 发布于上海
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猪巨细胞病毒gB基因克隆、原核表达及抗血清的制备的中期报告.docx

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猪巨细胞病毒gB基因克隆、原核表达及抗血清的制备的中期报告尊敬的评委老师们，大家好。我是该项目组的成员，今天为大家带来我们的中期报告。我们的研究方向是猪巨细胞病毒（PCV）gB基因的克隆、原核表达及抗血清的制备。为了实现这一目标，我们按照以下步骤进行。第一步，我们设计并合成了一对具有限制酶切位点的引物，用于从PCV基因组DNA中扩增gB基因。扩增产物经酶切、连接、转化等步骤后，成功地获取了含有gB基因的重组质粒。经测序验证，该重组质粒完整地包含了PCV的gB基因。第二步，我们进行了大肠杆菌BL21细胞的转化和克隆，筛选出gB基因重组蛋白表达量较高的一个阳性克隆株。通过SDS和Western blotting技术，我们证明该阳性克隆株成功地表达了目的蛋白。我们还进行了His-tag蛋白纯化和西方印迹检测，验证了纯化的蛋白具有特异的免疫反应性。第三步，我们利用SDS将纯化的蛋白制备为兔抗血清。经过一段时间的免疫和采血后，我们获得了一定量的抗PCV gB蛋白抗体。接下来，我们将进行抗血清的亲和层析及纯化。目前，我们已经完成了PCV gB基因的克隆、原核表达及抗血清的制备的前两步。我们的下一步工作是进行抗血清的纯化及进一步的鉴定和应用。感谢评委老师们的关注和支持，我们将继续努力，积极推进研究工作。谢谢！