1-2-3 实训 血球计数板显微计数法.pdfVIP

实训血球 计数板显微 计数法 (一)实训目的 进一步熟练显微镜的使用； 掌握使用血球计数板进行微生物计数的 基本方法。 Q/UJING 血球试数板 XUEQIU JISHUBAN 四 1.10m m2 (二)实训原理 显微镜计数法是指利用血 球计数板进行计数，是 一种常用的微生物计数 法。将经过适当稀释的 菌悬液(或孢子悬浮液) 放在血球计数板的计数 室内，在显微镜下进行 m XH 计数。可根据在显微镜 下观察的微生物数目换 算成单位体积内的微生 物数目，此法所测得的 结果是活菌体和死菌体 的总和。 1.10m 朝 ●图 血球计数板构造图 血球计数板有两种规格：一种是将1cm2面积分 为25个大格，每大格再分为16个小格；另一种 是16个大格，每个大格再分为25个小格。两者 都是总共有400个小格。 设5个中方格的总菌数为A,菌液稀释倍数为B, 如果是25个中方格的计数板，则： 1 mL菌液中的总菌数=(A/5) ×25×104×B=50000AB(个) 同理，如果是16个中方格的计数板，则： 1 mL菌液中的总菌数=(A/5) ×16×104×B=32000AB(个) 三、材料和用具 酿酒酵母、血球计数板、 盖玻片、显微镜等。 (四)操作步骤 菌悬液制备以无菌生理盐水将酿酒酵 母制成适当浓度的菌悬液。 镜检计数室在加样前，先对计数板的 计数室进行镜检。若有污物，则需 清洗，吹干后进行计数。 A.25大格×16小格型计数板 加样将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻 片，用无菌毛细管将摇匀的菌悬液由盖 玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛 细管作用自动进入计数室，一般计数室 均能充满菌液。注意加样时计数板内不 可有气泡。 显微镜计数加样后静止5min,然后将血 球计数板置于显微镜下，先用低倍镜找 到计数室位置，然后换成高倍镜进行计 数。 及时清洗血球计数板。 小格 中格(双边线) 酵母细胞 (五)实训结果 及时记录操作及结果。 (六)思考题 说明血球计数板计数的误差主要来自哪些 方面?如何减少这些误差、力求准确? 血球计数板在洗刷时，为什么不能用硬物 洗刷?