马铃薯脱毒种薯快繁技术研究.docxVIP

? ? 马铃薯脱毒种薯快繁技术研究 ? ? 王蔚杰，赵 娜，尚登翔，王发东，赵世霞，李 蔚 （金昌市农艺研究院，甘肃金昌 737100） 引言 随着马铃薯主粮化战略的推进，马铃薯种植面积日益增加。然而，在马铃薯生产中，病毒病的普遍发生导致马铃薯产量降低和商品性状退化，这种状况随着种植年限的增加逐年加重，严重制约着马铃薯产业的持续、健康发展。马铃薯脱毒种薯的繁育和推广可以从根本上抑制病毒病的发生和蔓延，是马铃薯产业发展的重要保障。脱毒试管苗的扩繁是脱毒种薯繁育的一个重要环节，培养基是脱毒试管苗生产的基础[1-5]。脱毒马铃薯原原种也叫微型薯，是脱毒试管苗在隔离条件下生产的种子，虽然个头小，但是纯度高，是繁育优良马铃薯的种子，其繁育应用广泛的栽培方式是无土基质栽培。研究发现蛭石、珍珠岩、草炭等混合配制的基质栽培可使马铃薯原原种总产量、商品薯产量较纯土壤种植均显著提高[6-9]。虽然国内外学者对马铃薯脱毒或快繁技术进行了大量研究，但对河西区域马铃薯脱毒种薯快繁技术优化研究较少，尚需进一步研究。因此，本研究通过比较不同培养基配比，筛选出最佳诱导和快繁培养基；通过比较不同基质配比，筛选出最佳栽培基质，为马铃薯脱毒种薯快繁提供技术支撑，同时促进本地区马铃薯产业高质量发展。 1 材料与方法 1.1 试验材料 将马铃薯品种“希森6号”置于室温催芽，待芽长至约3cm时，切取长约1cm的茎芽用作外植体材料。 1.2 试验方法 试验于2021年1月开始在金昌植物园组繁中心植物组织培养实验室、玻璃连栋温室、日光温室中进行。试验地位于北纬30°04′-31°58′、东经101°13′-102°19′，属于大陆性温带干旱气候，年均气温9.2℃，最高温23.7℃，最低温-6.2℃，年均日照2981.6h，无霜期141d，年均降水量139.8mm。 1.2.1 消毒处理 使用0.1%升汞对用作外植体材料的马铃薯茎芽浸泡8 min进行消毒，再用75%乙醇消毒30s 后，用无菌水冲洗6次。然后在解剖镜下剥离带1-2个叶原基约0.3mm长的茎尖用作外植体。 1.2.2 茎尖诱导 将消毒后的马铃薯外植体接种在诱导分化的培养基上进行茎尖分化培养。培养基pH值5.5-5.8，培养温度为（22±1）℃，光照度2500Lx，光照时间每天16小时。以不加激素的MS培养基（MS+蔗糖（30g/L）+琼脂（7g/L））为对照（CK），分别设置6-BA三个浓度（1.0mg/L，2.0mg/L，3.0mg/L），GA3三个浓度（0.1mg/L，0.2mg/L，0.5mg/L），NAA三个浓度（0.05mg/L，0.2mg/L，0.5mg/L）等27个不同茎尖诱导培养基处理，见表1。 表1 马铃薯茎尖诱导培养基不同配比 1.2.3 组培苗快繁 将诱导获得的脱毒小苗剪成带单个腋芽的茎段，接种在扩繁生根培养基上进行快繁。培养基pH值5.5-5.8，培养温度为（22±1）℃，光照度2500Lx，光照时间每天16小时。以不加激素的MS培养基（MS+蔗糖（30g/L）+琼脂（7g/L））为对照（CK），分别设置MS和1/2MS，琼脂（7g/L）和卡拉胶（2.5g/L），NAA四个浓度（0.0mg/L，0.5mg/L，1.0mg/L，1.5mg/L），蔗糖（30g/L）不改变等16个不同快繁培养基处理，见表2。 表2 马铃薯快繁培养基不同配比 1.2.4 组培苗炼苗移栽 在组培室中半开瓶盖炼苗1天，从组培室取出来，在夜间最低温度不能低于6℃的环境下，打开瓶盖，炼苗1-2天。炼苗后移栽时，需要把苗子上的培养基洗干净（最好用温水洗培养基，动作轻柔避免伤根，尽可能把培养基洗净，洗不干净容易滋生细菌）。然后用多菌灵（800倍液）进行杀菌，生根粉（400mg/L）进行蘸根，再定植在基质里。 1.2.5 脱毒种薯繁育 基质选用蛭石、泥炭土、珍珠岩，随机区组设计，共计7种基质配方（见表3），以100%泥炭土处理为试验对照，各处理基质体积相同。移栽前施均衡性复合肥200g/m2，将基质和肥料混合后浇透水，用塑料膜覆盖2-3天以增温。釆用试管苗扦插方式，株行距8*10cm，小区面积为0.5m2，每个处理3次重复。移栽15d后统计移栽成活率。成熟收获时，记录小区产量和结薯数，统计商品率。 表3 不同栽培基质配比 2 结果与分析 2.1 不同马铃薯茎尖诱导培养基筛选 不同马铃薯茎尖诱导培养基处理下分化的愈伤组织成苗率在60.00%-86.67%，27个试验处理的分生组织成苗率均高于对照CK的成苗率，成苗率较高的试验处理如表4所示，处理14号的成苗率最高为86.67%，处理16和17的次之，为80%，比对照CK 的成苗率高出20%以上。主要是诱导培养基中6-BA、GA3、NAA等植物激素及生长调节物质促进茎尖分化