SNT 2216-2008进出口动物源性食品中秋水仙碱残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2216--2008进出口动物源食品中秋水仙碱残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of colchicine residues in foodstuffs ofanimal origin for import and export-LC-MS/MS method2008-11-18 发布2009-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2216--2008前 言本标准的附录 A和附录 B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：谢文、丁慧瑛、奚君阳、岳振峰、陈笑梅、钱艳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 2216--2008进出口动物源食品中秋水仙碱残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法范围7本标准规定了动物食品中秋水仙碱残留量检测的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于鱼、鸭肉、牛肉、牛肝、牛肾和牛奶中秋水仙碱残留量的检测。2方法提要在磷酸盐缓冲溶液（pH8)条件下，用二氯甲烷提取样品中秋水仙碱，再用C1g固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。3试剂和材料除另有规定外，所有试制均为分析纯，水为二次蒸馏水，乙腈：高效液相色谱级。3.13.2正已烷：高效液相色谱级。3.3二氯甲烷：高效液相色谱级3.4甲醇：高效液相色谱级。3.5甲酸：高效液相色谱级。3.6磷酸二氢钠。3.7氢氧化钠。无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。3.8甲醇水溶液：甲醇-水（4+6，体积比）。3.90.15%甲酸溶液：移取0.15mL用水稀释至10bmL3. 10磷酸盐缓冲溶液：溶解1318g磷酸二氢钠于95omL水中，用0/1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液3. 11pH值到8.0,最后用水稀释至13.12秋水仙碱标准品（colchicine,CAS号为64-86-8,C22H2s,NO）纯度大于等于95%。3.13秋水仙碱标准储备溶液：称取适量标准品(3.12),用电醇溶解，溶液浓度为100 μg/mL。一18℃避光冷冻保存。有效期1个月。3.14标准工作溶液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成适当浓度的秋水仙碱标准溶液。临用前配置。3.15无水硫酸钠柱：80 mmX40 mm(内径)筒形漏斗，底部垫5mm脱脂棉,再装 40mm无水硫酸钠。3.16固相萃取柱:C18,500 mg,3 mL或相当者;使用前用 5 mL 甲醇和5 mL水预洗，保持柱体湿润。3.17有机相微孔滤膜:0.45 μm。41仪器和设备4.1‘高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。4.2旋转蒸发器。4.3粉碎机。 SN/T 2216—20084.4均质器。4.5旋涡混合器。4.6 离心机:4 000 r/min。4.7氮吹仪。4.8固相萃取装置。5试样制备与保存5.1牛奶：从所取全部样品中取出有代表性样品约250mL，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封,并标明标记。将试样于0℃～4℃保存。5.2鱼、鸭肉、牛肉、牛肝和牛肾：从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎，混合均匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样于一18℃冷冻保存。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤6.1提取6.1.1鱼、鸭肉、牛肉、牛肝和牛肾称取2g试样（精确到0.01g)置于 50 mL具塞塑料离心管中，加人2mL磷酸盐缓冲溶液（3.11），加入25mL二氯甲烷，在均质器中以14000r/min均质30 s，以4000r/min离心5min，将上层二氯甲烷提取液过无水硫酸柱，滤液收集于浓缩瓶中，样品残渣再加入20mL二氯甲烷，重复上述操作，合并二氯甲烷提取液，在 50℃以下水浴减压浓缩至近干，用4 mL正已烷和 4 mL水依次将残渣转移至10 mL具塞玻璃离心管中，于旋涡混合器上以2000 r/min，混匀1 min，以2000 r/min离心3min，弃去上层正已烷溶液，再加入4mL正已烷，重复上述操作，下层溶液待净化。6.1.2牛奶称取 4 g试样(精确到 0.01 g)置于 50 mL具塞塑料离心管中,加甲醇至 20 mL，以 4000 r/min离心5min，取10.0mL上清液加水至25mL，加20 mL正已烷，于旋涡混合器上以2000r/min，混匀1min，以4000 r/min离心3min,弃去上层正已烷溶液，下层溶液待净化。6.2　净化将下层溶液转移至C1s固相萃取柱（3.1