WST 59-1996尿中4-氨基-2，6-二硝基甲苯的气相色谱测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中 4-氨基-2,6-二硝基甲苯的WS/T 59-1996气相色谱测定方法Urine--Determination of 4-amino-2,6-dinitrotolueneGas chromatographic method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中4-氨基-2，6二硝基甲苯的气相色谱测定方法。本法最低检测浓度为4ug/L。本标准适用于接触三硝基甲苯(TNT)的工人尿中4-氨基-2，6-二硝基甲苯的测定。2原理尿样加盐酸加热水解后，在pH7～8用甲苯萃取尿样中4-A，进气相色谱仪测定。采用OV-17柱分离，电子捕获检测器检测，以保留时间定性，峰面积定量。3仪器3.1气相色谱仪，电子捕获检测器。3.2旋涡混合器。3.3容量瓶，10mL。3.4具塞试管，5mL。3.5微量注射器，5μL。3.6聚乙烯塑料瓶，50~100mL。3.7尿比重计。4 试剂本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯级。4.1实验用水：为重蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4.2盐酸，P20=1.19g/mL。4.3碳酸氢钠。4.4无水乙醇。4.5甲苯。4.62,6-二硝基甲苯，化学纯。内标物。4.72，6-二硝基甲苯溶液：称取50mg2,6-二硝基甲苯溶于甲苯中，并稀释至100mL，混匀。逐级稀释成含内标0.5μg/mL的甲苯溶液。4.84-氨基-2,6-二硝基甲苯（4-A)标准品。4.94-氨基-2，6-二硝基甲苯标准溶液：取标准品以无水乙醇为溶剂，配成浓度为1mL相当于2mg4-A的贮备液。临用前，以甲苯或含内标0.5μg/mL的甲苯溶液(4.7)稀释成1mL相当于20μg4-A的标1997-05-01实施中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 WS/T 59--1996准溶液。4.10质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶收集约100mL接触TNT工人的班后尿，尽快测量比重，每100mL尿加10mL盐酸（4.2）。夏季运输时最好冷藏。分析前放普通冰箱内，可保存两周。6分析步骤6.1仪器操作条件色谱柱：柱长1.6m，内径3.2mm，玻璃柱。OV-17：ShimaliteW(AW-DMCS)201D(80~100)=1.5:100。柱温：220℃。程序升温：初温为200℃，保持0.4min以后以10℃/min的速率升温至220℃，然后再以5℃/min的速率升至240℃，保持1min，分析结束。载气（氮气）：50mL/min。6.2空白试验取正常人混合尿按照样品处理（6.3)的操作同样处理，与样品同时进行测定。6.3样品处理取1mL尿样于5mL具塞试管中，加入0.1mL浓盐酸，混合均匀（已加盐酸保存的尿样取1.1mL），于100C水浴中放置1h。冷却后，用过量固体碳酸氢钠（4.3)调至pH78，然后用1mL甲苯（4.5)[或含内标的甲苯溶液（4.7)]萃取，在旋涡混合器上振摇3min，放置分层，上层甲苯溶液供分析用。6.4标准曲线的绘制取7个容量瓶，按下表配制标准管。4-A标准管的配制6管505. 0010. 004-A标准溶液（4.9),mL0. 250.501.007.505. 000. 0010.009.759. 509.00甲苯[或含内标（4.7)}，mL10200. 51254-A浓度,μg/mL0各取2μL以上标准管中的溶液进气相色谱仪，按仪器操作条件(6.1)测定，重复进样三次。以4-A浓度为横坐标，各浓度峰面积（或与内标峰面积之比）平均值为纵坐标，绘制标准曲线。6.5样品测定取2μL按6.3条处理得到的甲苯萃取液进样，按仪器操作条件（6.1)测定。用保留时间定性，峰面积(或与内标峰面积之比)定量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。7 计算7.1按式（1)计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数k。1.020 -1.000..(1)k=实测比重-1.0007.2按式(2)计算尿中4-氨基-2,6-二硝基甲苯的浓度。X-c·k(2)式中：X—尿中4-氨基-2,6-二硝基甲苯的浓度，mg/L.; WS/T59--1996c——由标准曲线查得的4-氨基-2,6-二硝基甲苯浓度，μg/mL。8说明8.1本法的检测限为7.2×10-1²g。4-A浓度在0～50mg/L范围内进样2μL，浓度与峰面积（或峰面积之比)呈线性关系。在应用中，标准曲线的上限为20mg/L，已能满足分析要求。当尿中4-A浓度为0.90，2.71，5.42mg/L时，批内变异系数分别为2.0%，2.2%和1.3%，批间变异系数分别为4.1%，3.7%和3.4%（n=6）。尿中4-A浓度为0.94~5.41mg/L时，加标回收率为8