SN_T 3152-2012出口食品中致泻大肠埃希氏菌检测方法 基因芯片法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3152—2012出口食品中致泻大肠埃希氏菌检测方法基因芯片法Determination of diarrheagenic Escherichia coli in food for export-GeneChip method2012-05-07 发布2012-11~16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3152--2012前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、天津生物芯片技术有限责任公司、中华人民共和国天津出人境检验检疫局、北京市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：魏海燕、曾静、张西萌、高旗利、王磊、孙亚民、马贵平。I SN/T 3152-2012出口食品中致泻大肠埃希氏菌检测方法基因芯片法1范围本标准规定了食品中致泻大肠埃希氏菌（肠道致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌、肠道出血性大肠埃希氏菌、0157血清型大肠埃希氏菌)的基因芯片检测方法。本标准适用于食品中致泻大肠埃希氏菌的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T4789.6食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室　生物安全通用要求GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测SN/T 1193基因检验实验室技术要求3术语、定义和缩略语3.1　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1.1致泻大肠埃希氏菌diarrheagenic Escherichia coli能够引起细菌性腹泻的大肠埃希氏菌。食物中常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括肠道致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌和肠道出血性大肠埃希氏菌4类。3.1.2肠道致病性大肠埃希氏菌enteropathogenic Escherichia coli一类能够引起宿主细胞黏附及擦拭性损伤，且不存在志贺毒素的大肠埃希氏菌，引起宿主细胞黏附及擦拭性损伤的关键基因是 Lee致病岛上的编码紧密素的 eae 基因。3.1.3产肠毒素大肠埃希氏菌 enterotoxigenic Escherichia coli一类能够分泌热稳定性肠毒素或热不稳定性肠毒素的大肠埃希氏菌，热稳定性肠毒素按其不同来源可以分为猪源热稳定肠毒素和人源热稳定肠毒素两种类型，其编码基因分别为 stap和 stah，热不稳定性肠毒素的编码基因为lt。两种肠毒素在产肠毒素大肠埃希氏菌中可以单独存在，也可以同时存在。 SN/T 3152--20123.1.4肠道侵袭性大肠埃希氏菌enteroinvasive Escherichia coli能够人侵上皮细胞而引起腹泻的大肠埃希氏菌，人侵上皮细胞的关键基因是侵袭性质粒上的抗原编码基因,如ipaH 基因。3.1.5肠道出血性大肠埃希氏菌enterohmorrhagic Escherichia coli能够分泌志贺毒素的大肠埃希氏菌，志贺毒素是肠道出血性大肠埃希氏菌引起临床症状必须的条件，志贺毒素编码基因为 stz，志贺毒素分为没有免疫交叉反应的两种类型，其编码基因分别为strl和st.r2,stl 和 str2在肠道出血性大肠埃希氏菌中可以单独存在，也可以同时存在。另外,有些肠道出血性大肠埃希氏菌具有肠道致病性太肠埃希氏菌的致病特征即能够引起宿主细胞黏附及擦拭性损伤，存在Lee致病岛，此类肠道出血性大肠埃希氏菌称为典型肠道出i血性大肠埃希氏菌。3.1.6大肠埃希氏菌0157血清型Lscherichitarcoli-9157.serogroup一类曾引起大规模爆发和流行的致泻性大肠埃希氏菌血清型，同其他血清型致泻性大肠埃希氏菌相比，O157血清型致病性更强，最低致病剂量更低。y.基因为大肠埃希氏菌（157血清型（抗原合成的关键基因，具有较高的血清型特异性，可作为靶基因用于检测大肠埃希氏菌（157血清型。3.1.7信噪比 signal noise ratio杂交信号值与杂交背景值的比值3.2缩略语下列缩略语适用于本文件。3.2. 1 EIEC:Enteroinvasive Efhlcoli肠道侵袭性大肠埃希氏菌EHEC:Enterohemorrhhgic Estricht coiti:肠道出血性大脑埃希氏菌.3EPEC:EnteropathogerioEscferichialcoli，肠道致病性大肠