SNT 2177-2008危险品哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2177--2008危险品哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验方法Test method of in vivo mammalian bone marrow chromosome aberrationfor dangerous goods2009-03-16实施2008-09-04发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局显较 1908 查议真伤数码防伪 SN/T 2177-2008前言本标准修改采用联合国经济合作与发展组织(OECD)化学品测试方法No：475《哺乳动物骨髓染色体畸变试验》（1997）。本标准与 OECD化学品测试方法 No.475 相比,存在以下差异：-对 OECD化学品测试方法No.475 进行了编辑性修改;增加了前言部分；增加了定义部分；一删掉了试验报告部分。-本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所。本标准主要起草人：张园、赵好力宝、于智睿、赵琢、熊中强、李学洋。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2177--2008危险品哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验方法范围本标准规定了体内哺乳动物骨髓染色体畸变试验的术语和定义、试剂和仪器、试验方法、试验结果及结果评价。本标准适用于检测化学品对骨髓细胞的致突变性。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准GB14925实验动物环境及设施卫生部《消毒技术规范》3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1染色单体型畸变 chromatid-type aberration染色体结构损伤，表现为染色单体断裂或染色单体断裂重组的损伤。3.2染色体型畸变 chromosome-type aberration染色体结构损伤，表现为在两个染色单体的相同位点均出现断裂或断裂重组的改变。3.3核内复制endoreduplication在 DNA复制的 S期之后，细胞核未进行有丝分裂就开始了另一个 S期的过程。其结果是染色体有4，8，1··倍的染色质。3. 4裂隙gap染色体或染色单体损伤的长度小于一个染色单体的宽度，为染色单体的最小的错误排列。3.5染色体数目畸变 chromosomal numerical aberration染色体数目发生改变，不同于正常核型。3.6多倍体polyploidy哺乳动物染色体数目正常是二倍体，在化学诱变剂的作用下，染色体数目成倍地增加成三倍体、四倍体等。 SN/T 2177--20083.7染色体结构的畸变chromosomal structure aberration通过显微镜可以直接观察到的发生在细胞有丝分裂中期的染色体的结构变化。如染色体中间缺失和断片，染色体互换和内交换等。3.8最高剂量highest dose产生毒性体征的剂量，更高剂量将引发试验动物死亡。4试剂和仪器4.1试剂-0.1%秋水仙碱；-0.9%氯化钠溶液;-0.075mol/L氯化钾溶液;一固定液：甲醇与冰乙酸以3：1混合,临用时现配；一姬姆萨(Giemsa)染液、姬姆萨应用液，配制方法见《消毒技术规范》；磷酸盐缓冲液(pH7.4），配制方法见《消毒技术规范》。4.2仪器和器材实验室常用设备、生物显微镜、恒温水浴箱37℃主5℃离心机、解剖剪、镊子、注射器、灌胃针头、离心管、吸管、滴管、试管架、载玻片、塑料吸瓶、干净纱布、滤纸等。5试验方法5.1试验动物220g）。每个剂量组每个性别动物不少于5只。（体重 180成年小鼠（体重 25 g～30 g）,或大、试验动物饲养条件应符合GB14924/1和GB14925有关规定。5.2剂量分组应进行预试验以选择最高剂量，为避免出现假阴性结果应适当增大剂量范围。如果受试样品具有毒性，应在第一个采样时间点设三个剂量,设置的剂量应包括从最大毒性至最小毒性或无毒性的范围。第二次采样时间点仅需设置最高剂量。按等比级数2向下设置中、低剂量组。5.3限度试验如果单次染毒剂量不小于2000mg/kg体重，未出现毒性效应，且根据资料预期受试物无遗传毒性，则不需要进行其他染毒剂量的试验。5.4样品处理通常用蒸馏水、等渗盐水、植物油、食用淀粉、羧甲基纤维素钠等。如使用特殊溶剂或载体，应有参考资料说明其成分。5.5 试验步骤5.5.1 染毒采用灌胃法，也可腹腔注射。一般情况下染毒一