SN 1573-2005贝类中神经性贝类毒素检验方法 小鼠生物法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1573—2005贝类中神经性贝类毒素检验方法小鼠生物法Inspection of neurotoxin shellfish poison in shellfish--Method of mouse biology2005-05-20 发布2005-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1573—2005前言本标准的附录 A为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准主要起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局本标准主要起草人：赵‧昕、曹际娟、秦奏成、宋慧君、于珂、唐守亭。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1573—2005贝类中神经性贝类毒素检验方法小鼠生物法1 范围本标推规定了贝类及其制品中神经性贝类毒素检验的抽样、制样和小鼠生物检测方法。本标准适用于海产双壳类贝肉、贝柱和其他可供食用部分的神经性贝类毒素的检验。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1神经性贝类毒素neurotoxin shellfish poinson, NSP化学结构以短裸甲藻毒素（brevetoxin-2)为代表的，摄食后可产生神经性中毒和消化道症状的存在于贝肉内的海洋生物毒性物质的总称。2.2小鼠单位mouse unit,MU对体重为20g的小白鼠腹腔注射1mL贝类提取液后，在15min时致死白鼠所需的最低毒素量。2. 3中位数 median data把变量值按大小次序排列，居于中间位置的那个数值就是中位数。3抽样和制样3.1检验批以不超过100t为-检验批，同检验批的商品应具有相同的特征，如产地、季节、规格、包装和标记等。3.2抽样数量根据各检验批的重量，按表1确定抽样点(件)数。如为散装的应均匀抽样。表1样品抽样点（件)数的确定检验批重量/t抽样点(件)数混合样品数210 以下10315 11~502051~10043.3抽样方法按4.2规定的抽样点（件）数，随机抽取样品。从每5个抽样点（件）抽取的原始样品组成一个混合样（依受检贝类品种决定样品的采集量，应保证其可检部分重量不少于1000g），装入清洁容器内，加封标记后，及时送交实验室检验。3.4样品制备3.4.1实验室样品制备分析样品要有充分的代表性，即从混合样品中挑选良好的贝类个体去壳取肉，去壳肉量应达到1 SN/T 1573,取其中 200g作为检样，另800g作为复检样、备检样和留样。新鲜贝类如果不能及时检验，按方法将贝肉分离，将100mL盐酸(0.1mol/L）中加人沥水后的200 g贝肉，置于4℃冷藏保存,备检。3.4.2试样制备牡蛎、蛤及贻贝用清水将贝壳外表彻底洗净，切断闭壳肌，开壳，用清水淋洗内部去除泥沙及其他外来物。将连接在交合部的组织分离，仔细取出贝肉，避免割破肉体。开壳前不得加热或用麻醉剂处理。收集200g肉置于10号筛子中沥水5min(避免贝肉堆积），检出碎壳等杂物，将贝肉均质。扇贝取贝肉用作检测。沥干及均质过程同。贝类罐头将罐头内所有内容物(肉及液体)倒人均质器充分均质。如果是500g以上大罐，将贝肉沥水并收集沥下的液体，分别称量，将固形物和汤汁按原比例混合，充分均质。用酸保存的贝肉沥去酸液，将沥干的贝肉充分均质。冷冻贝类在室温下，使冷冻的样品（带壳或脱壳的)呈半冷冻状态，按方法开壳、淋洗、取肉、均质。贝肉干制品干制品可于等体积盐酸(0.1mol/L)溶液中4℃下浸泡24h48h,按方法沥干、均质。3.5试样保存上述3.4中均质处理的样品如不能及时检测，可取100mL盐酸（0.1mol/L)溶液100g加人已均质贝肉中，置于4℃冷藏保存（尽可能及时检验）。4测定方法4.1方法提要本方法采用小鼠单位定量测定 NSP毒素的总量，采用 brevetoxin-2作为毒素的标准品。根据小鼠注射贝类提取液后的死亡时间,查出鼠单位,并按小鼠体重，计算确定每克贝肉内 NSP的小鼠单位。所测定结果代表存在于贝肉内各种化学结构的 NSP。4.2试剂和材料4.2.1丙酮（分析纯）。4.2.2二氯甲烷（分析纯）。4.2.31%吐温-60生理盐水。4.2.4无水硫酸钠。4.2.5小白鼠：体重为20 g土1gICR品系，雄性4.2.6标准品：短裸甲藻毒素（brevetoxin-2）。4.3设备和器皿4.3.1旋转蒸发器。4.3.2真空泵。4.3.3均质器。4.3.4化学通风柜。4.3.5天平：感量为0.1g。4.3.6 冰箱:0℃～5℃和-15℃～-20℃。4.3.7500mL梨形瓶或圆底烧瓶。2 SN/T 1573—20054.3.8烧杯500 mL和200 mL。4.3.9布氏漏斗。4.3.10500mL抽滤瓶。4.3.11500mL