DB15_T 542-2013小麦粒线虫检疫鉴定方法.pdf

ICS 65, 020. 20B16备案号：36659-2013DB15内蒙古自治区地方标准DB 15/ T542-2013小麦粒线虫检疫鉴定方法Identification of Anguina tritici Chitwood2013-01-20发布2013 0320实施内蒙古自治区质量技术监督局发布 DB15/ T542-2013前言本标准的附录A、B为资料性附录。本标准由内蒙百出入境检验检疫局提山并解释。本标准起草单位：内蒙占入境检验检疫局、满洲里出入境检验检疫局本标准主要起草人：杨永生、郭铁等、赵治国、董资、刘玮瑞、张永宏、潘国期、李刚。 DB15/ T5422013小麦粒线虫检疫鉴定方法范围本标雅规定了对小变粒线虫的检疫鉴定方法。本标准适川丁小麦种子、柏株上小麦粒线虫的检疫和鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的可用文件，仪所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的终改单）适用于本文件。GB15569农业植物调运检疫规程3原理3.1学名：:Angaina /ritici (Steinbuch, 1799) Chitwood, 1935美文名：wheat gall nematoclea分类地位：垫刃HTylenchida Thomc，垫刃总科Tyelnchoidca Orley粒科Anguinidae Nicoll粒线山属AnguinaScopoli.异名：Anguillalina scandens (Schncider, 1866)Goodey, 1932:Angudlulina (Anguina) scanidens (Schneider, 1866) Goodey, 1932,(W.Schncider, 1939) :3. 2鉴定依据该线虫在小麦种子、植株上的症状，线虫的形态特征，该线虫的生物学特性参见附录A。t本语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.1中食道球medianbulb食道中体部人的球状体。4.2阴门valva雕性线虫生殖系统求端在虫体股而的开口。4.3交合制spiculc生殖系统本端的对件化的刺状结构。 DB15/T542--20134. 4引带 gubemaculum交合期囊中引导交合制运动的骨化的情状结构。4.5交合伞bursac在摊性线虫部侧面，在交合刺的附近（有的在尾翁）表皮的延仲的薄膜状的抱片。5仪露用具及试剂5.1仪器用具生物显微镜、测微尺、体裙显微镜、解割刀、解剖针和小子、挑针、回破片、载玻片、盖股片酒精灯、烧杯、培养阻、干燥器、吸管。5.2试剂40%甲醛、三羟基乙酸胺、蒸馏水、指甲汕；TAF周定波（按体积比40%甲整：整基乙酰胺：蒸增水=7:2：91）6现场检验及实验室检验6.1抽样按熙GB15569执行。6.2现场检验6. 2. 1幼苗检验受粒线虫段害的小麦检标接近地面的基基部增粗，分翼增多、矮化；叶片卷曲，策缩，生长量畸形。整个植探相矮担曲。首期症状随着植株的生长痛状可能遥渐减轻。病株叶片偶尔1有很小的圆形突起，即虫接。6.2.2成株检验受害稳子比止常的小、短租相，额片不正常开裂。额片上的很小或者无。病穗的转黄通常比健穗需要史长时间，其部分或全部耗粒成为出接，初期虫矮为绿色，比间期灌浆的安权要肥人而围，后期出要变成深棕色或黑色，面黑麦上的变成淡黄色，成熟的虫要略缩小，比粒短而國，坚硬，不易格碎。剖并后，内部充满自色絮状物，即线虫劲虫，（形态特征参义附录B)6.3实验室检验6.3.1样品制备从受检小麦种子中排选虫要、癌小粒，放入小培养Ⅲ中，加入少最消水，在解测镜下，川设子和挑针排破虫要表皮，释放出其中的线虫出，川挑挑取或用吸管收集线虫。6.3.2制片在载玻片上滴滴清水。在解镜下，用挑针排取线虫，放入载玻片上的水滴中，川用酒精灯热 DB15/ T5422013杀死线出，在解别镜下整理好，95%乙醇数演冲洗，将种皮和内果皮分别放在载皱片1，加盖破片。6.3.3镜检将制成的坡片放在生物显微镜100~400倍下观察。7鉴定特征7. 1粒线虫属描述虫体的体环纹很细，道常只在食道区可以观察到。侧有4条或更多条很细的侧线，成虫的侧线只有在新鲜的标本上才可看到。后区低平，稍有缴缩，解片1有6个凸的辐射状脊。食道前体够大，在与中食道球交接处盈缩。食道腺球略成梨形，但形状有变化，有时为不观则的状，不段盖肠。食道一肠端门小，居望锥形，渐渐变细，形成一个纯的末端。7.2小麦粒线虫鉴别特征7.2.1测最值罐虫L= 3.0~5.2 mm; a= 13~30, b= 9.8~25.0. c~ 24~63,V= 70~95;F1- K:stylet = 8~ 11 μum.雄: L= 1.9~2.5 mm; a= 21~~30, b=