JC 542-1994滑石粉微生物学检验方法.pdf

JC中华人民共和国建材行业标准JC/T542—94滑石粉微生物学检验方法1994-03-26发布1994-12-01实施国家建筑材料工业局发布 中华人民共和国建材行业标准JC/T542—94滑石粉微生物学检验方法1主题内容与适用范围本标准规定了滑石粉的微生物学检验方法及范围，本标准适用于医药、食品及化妆品用滑石粉的微生物学检验。2术语菌落总数：指样品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落总数。3检验通则3.1取样及注意事项3-1.1-每批滑石粉应随机抽两个或两个以上包装完好的单位，试样量不少于10g，以使检验结果具有代表性。3.1.2凡异常的供试品，则选取有疑同的样品进行检验.凡包装开启可见幕变的、无频检验即可判为不合格。3-1.3在检验前，应严格保持包装的原有状态，防止再污染。并放在阴凉干燥处。防止因微生物再紫殖而影响检验结果，凡原包装已启开，则无代表性。3-1.4样品的格释，须在1~2h内完成，以防止微生物繁殖或死亡。3-1.5微生物检验全过程，必须在无菌操作条件下进行，凡直接与样品接触的用具，均应事先灭菌并保持无菌，3.1.6从样品检出致病菌的报告发出之日起，该菌菌种需保存-个月备查，阴性样品可及时处理。3.2供试液制备的材料和仅器a.天平，感量0.1g1b.三角烧瓶：300mL或500mL；c.玻璃珠：45mm；d.量简：100mLe.电炉；高压消毒锅：g.滤纸.3.3供试液的制备方法称10g试样，放入装有90mL稀释剂（生理盐水)和十几个玻璃球的三角尧瓶中，经报播制成1：10的试液备用。取用时必渠混匀。3.4阳性菌株对照试验3.4.1每次检验，应同时进行阳性对照生长试验。3. 4.2对照试验加入的已知菌量，每批样品应控制在50~100个范围之内，3. 4. 3常用的阳性对照菌株，卫生部检定所编号：大肠杆菌44102、绿脓杆菌10104、金黄色葡萄球菌国家建筑材料工业局1994-03-26批准1994-12-01实施1 JC/T 54294附录A微生物学检验的有关培养基和试剂(补充件)41营养球脂培养基（肉汤琼脂培养基）a.成分蛋白陈10g氯化钠5g琼脂15g牛肉膏3g蒸馏水1 000mLb.制法将蛋白陈、氯化销、琼脂、牛肉膏加到蒸增水中，微温使溶，再加热煮沸，待琼脂完全溶化后，混匀，用1mol/LNaOH溶液调pH值为7.4士0.2，过滤，分装于三角烧瓶，经121C，高压灭巢20min后，忙存于0~4C冷暗处备用。42虎红琼脂培养基成分蛋白陈5g葡荷萄糖10g磷酸二氢钾1g硫酸镁（MgSO4·7H,O）0.5g琼脂20g4/3000虎红水溶液100mL蒸馏水900mLb.制法将上述（除虎红水溶液外)各成分，分别加于蒸增水中，加热溶解，过滤，再加入虎红水溶液(四氯四碘荧光索落液），同A1中b项分装后，在121C高压灭菌20min，A3乳糖胆盐培养基a.成，分蛋白陈20g猪胆盐5g乳糖5g0.4%甲酯紫水溶液2. 5mL蒸馏水1 000mLb.将蛋白陈、猪胆盐及乳糖溶于蒸水中，调pH值为7.4，加入指示剂(0.4%漠甲酚紫水溶液)混匀，分装于有小例管的试管中(见A12中b项)，置于115C高压灭需20min。A4伊红美兰(EMB)琼脂a.成分10 JC/T 54294蛋白陈10g乳糖10g磷酸二氢钾2g琼脂20g2%伊红水溶液20mL0.5%美兰水溶液13mL蒸馏水1 000mLb.制法先将琼脂加到900mL蒸增水中，加热落解，然后加入磷酸二氢钾、蛋白陈混匀，使之溶解，再以蒸馏水补足至1000mL，调pH值为7.2~7.4.分装于烧瓶内，在121C高压灭菌15min后备用，用时，加入乳糖并加热融化踪脂，在60℃左右以无菌手续加入灭菌的伊红、美兰溶液，摇匀，倾注平皿使用，A5蛋白陈水a.成分蛋白陈20g氟化钠5g蒸馏水1 000mLb.制法将上述成分加热熔化，调pH值为7.0～7.2，分装小试管，经121C高压灭菌15min。A66靛基质试剂（柯凡克试剂）a.成分戊醇75mL对二甲氨基苯甲醛5g,浓盐酸25mLb.制法将对二甲氨基苯甲醛加入戊醇中，揽动使之完全溶解，然后1滴1滴缓慢地加入盐酸25mL。A7革兰氏染色液A7.1染减制备A7.1.1结晶素染色液成分结晶紫1g95%乙醇20mL1%草酸铵水溶液80mLb.制法将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸溶液混合。A7.1-2革兰氏碘液显成分碘1g碘化钾2g蒸编水300mLb.制法11 JC/T 542—94将碘与碘化钾进行混合，加入蒸馏水少许，充分振据，待完全落解后，再加蒸馏水至300mL。A7.1.3脱色液：95%乙醇A7.1.4复染液A7.1.4.1:沙黄复染藏成分0. 25g95%乙醇10mL蒸幅水90mLb.制备将沙黄溶解于乙醇中，然后