白血病淋巴瘤免疫分型.pptVIP

白血病淋巴瘤免疫分型 * 当前第1页\共有33页\编于星期五\20点 * 流式细胞术的基本概念 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量 当前第2页\共有33页\编于星期五\20点 * 散射光信号和荧光信号 前向角散射光（FSC, Forward Scatter） 入射激光的前向散射光信号 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光（SSC, Side Scatter） 入射激光90?角的散射光信号 细胞粒度及细胞内相对复杂性 荧光素与特异抗体结合，荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强。 当前第3页\共有33页\编于星期五\20点 * CD45/SS示意图 当前第4页\共有33页\编于星期五\20点 * 抗原分布 表面,胞浆,核内 是共同检测还是分别检测? 表面 胞浆 核内 CD3, CD4, CD8, tetramer cytokines DNA CD3,4,8, tetramer + Cytokines CD3,4,8, tetramer + DNA Cytokines + DNA CD3,4,8, tetramer + Cytokines + DNA 当前第5页\共有33页\编于星期五\20点 * 设门 08-03307 当前第6页\共有33页\编于星期五\20点 * 设门 全部 细胞 门内细胞 08-03307 当前第7页\共有33页\编于星期五\20点 * 当前第8页\共有33页\编于星期五\20点 * 血液肿瘤分类进程 当前第9页\共有33页\编于星期五\20点 * 白血病免疫分型的理论基础 白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原标志是表达于正常造血细胞不同分化发育阶段的分化抗原。虽然是恶性肿瘤细胞，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病/淋巴瘤进行免疫分型。为了正确分析白血病/淋巴瘤细胞，必须对正常造血细胞分化抗原的表达模式有充分的了解。只有熟悉正常细胞的抗原表达模式，才能辨认白血病/淋巴瘤细胞的存在。 当前第10页\共有33页\编于星期五\20点 * 细胞类型鉴定 Borowitz et al (1993) AJCP 100:534-40. Steltzer et al (1993) Ann NY Acad Sci 667:265-280 当前第11页\共有33页\编于星期五\20点 * CD45/SS示意图 正常骨髓细胞 血液肿瘤细胞 老化粒细胞 、噬酸细胞 早幼—成熟粒细胞 M3、CML 单核细胞 M4、M5 LGL 淋巴细胞 CLL、ALL、CLD 正常前体细胞 M0、M1、M2、 嗜碱性粒细胞 M4、M5、ALL 成熟红细胞、血小板 M6、M7、MM 细胞碎片 Pre-B-ALL 非血液来源细胞 当前第12页\共有33页\编于星期五\20点 * B淋巴细胞分化与抗原表达关系图 Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine 当前第13页\共有33页\编于星期五\20点 * T淋巴细胞分化与抗原表达关系图 Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine 当前第14页\共有33页\编于星期五\20点 * 粒细胞分化与抗原表达关系图 Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine 当前第15页\共有33页\编于星期五\20点 * 单核细胞分化与抗原表达关系图 Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine 当前第16页\共有33页\编于星期五\20点 * 非肿瘤T淋巴细胞表型 当前第17页\共有3