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兽医临床诊断技术讲稿 兽医临床诊断技术 第九章 实验室检验 当前第1页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 血液样本的采取与抗凝 血液样本的采取 采血的部位和方法,根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。 毛细血管采血法 除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外,其他各项测定均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管采血。采血前先剪毛,酒精棉球消毒,待酒精挥发后,用消毒的干燥的针头迅速刺入2~3mm深,让血液自然流出,且勿挤压以免混入过多组织液。 流出的第一滴血,可用于制作血片,然后用干棉球擦去局部的剩余血液,用流出的第二滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定,若利用第三滴血时,仍要将第二滴血擦干,否则流出的血不能形成滴状,不易吸取。 静脉采血法 马、牛、羊可由颈静脉采血。鸡可由翼下静脉采血,即用细针头刺入翼下静脉后,任血液自行流出并接入试管中。犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉采血。局部剪毛消毒,用止血带扎住采血部上端,使静脉怒张,用消毒、干燥的注射器接上针头,针头斜上面刺入静脉采血,待抽至所需量后,先放松止血带,再用消毒棉球按住伤口,拔出针头。除去针头,将血液缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时,试管内加抗凝剂,并立即混匀,以免凝固。 心脏采血法 多用于鸡及实验动物多量血液时,鸡可由胸腔入口处向心脏刺入由于心腔压力较静脉高,血液自然涌入注射器,兔及鸡亦可在左侧胸部第1、2肋间,心搏动明显处,针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入。 当前第2页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 血液的抗凝 草酸钠 是常用的抗凝剂,每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。 双草酸盐抗凝剂 草酸钠 0.8g 草酸铵 1.2g 蒸馏水 加至100ml 溶解后吸取0.5ml,加入供采血试管或小瓶中,置干燥箱内(温度不超过80℃)烘干备用,可供5ml全血抗凝。 当前第3页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)每10mg可使5ml全血抗凝;或配成10%的溶液,每2滴可使5ml全血抗凝。可适用于一般的血液学检查,特别是血小板计数,但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,不适合于血象及血小板功能检查。 3.8%枸橼酸钠溶液 每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因其毒性小又可作为血液保养液。但不适用于血液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢,故只能配成溶液,不能用粉剂。 血液的抗凝 当前第4页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 肝素 肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞和血小板计数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景,更不能用于凝血象的检查。 血液的抗凝 通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶内,放于37~50℃中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml血液不凝固,肝素抗凝剂应及时使用,放置过久易失效。 怀疑传染病时,采血应防止到处流散,检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。 当前第5页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 红细胞沉降率测定 魏氏法 魏氏血沉管长30cm,内径2.5mm管上有0~200的刻度,每一刻度的距离为1mm,其溶积为1ml。 先向10ml刻度试管中加入3.8%枸橼酸1ml,再自静脉采血4ml,颠倒混合数次,然后用魏氏血沉管吸取抗凝剂至刻度0处,擦去管外血液,在室温条件下,垂直放于血沉管架上,经15、30、45、60min,分别观察并记录细胞沉降数值。 当前第6页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 红细胞沉降率测定 “六五”型血沉管法 “六五”型血沉管法内径0.9cm,全长17~20cm,管上有100个刻度容积为10ml。 于血沉管中加入抗凝剂(草酸钠0.015~0.02g,枸橼酸钠粉末0.04~0.05g),自颈静脉直接采血至刻度“0”处,立即充分混合,于室温垂直立于试管架上,镜15、30、45、60min各观察一次,并记录红细胞沉降的数值。 当前第7页\共有32页\编于星期五\22点 兽医临床诊断技术讲稿 血液检验 红细胞沉降率测定 各种动物的正常血沉值 动物种类 15分 30分 45分 60分 测定方法 马 驴 黄牛 水牛 奶牛
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