NY_T 3947-2021CN 畜禽肉中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的测定 高效液相色....docx

ICS 67.120.10 CCS B 45 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3947—2021 畜禽肉中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱 氨酸和硒代蛋氨酸的测定 高效液 相色谱-原子荧光光谱法 D etermination of selenocystine, methylselenocysteine and selenotmethionine in livestock and poultry meat by high performance liquid chromatography-atomic fluorescence spectrometry 发布2021-11-09 2022-05-01实施 发布 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3947—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》和GB/T 20001.4—2015《标准编写规则 第4部分：试验方法标准》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出。 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口。 本文件起草单位：江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所、农业农村部环境保护科研监测 所、江西省农业科学院微生物应用所、江西新农园实业有限公司。 本文件主要起草人：魏益华、张金艳、邱素艳、袁林峰、黄青青、张标金、袁丽娟、谢敏、聂根新、戴廷灿、 陈庆隆、董秋洪、陈柳萌、赵云、卢峰。 NY/T 3947—2021 畜禽肉中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的测定 高效液相色谱-原子荧光光谱法 1 范围 本文件规定了畜禽肉中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸含量的高效液相色谱原子荧光 光谱测定方法。 本文件适用于猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉和鸭肉等畜禽肉中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸 的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注目期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸经蛋白酶水解提取，提取液经超滤管离心净化， 经反相离子对液相色谱分离，原子荧光光谱仪测定。 5 试剂和材料 以下所用试剂，除特殊注明外，均为优级纯试剂；水为符合GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇(CH?OH,CAS 号：67-56-1):色谱纯，纯度≥99.9%。 5.1.2 甲酸(HCOOH.CAS 号：64-18-6):色谱纯，纯度≥98%。 5.1.3 盐酸(HCl,CAS 号：7647-01-0):纯度为36.0%～38.0%。 5.1.4 磷酸氢二铵[(NH?)?HPO;,CAS 号：778328-0]。 5.1.5 四丁基溴化铵(Ci?HNBr,CAS 号：1643-19-2):离子对色谱纯。 5.1.6 碘化钾(KI,CAS 号：7681-11-0)。 5.1.7 氢氧化钾(KOH,CAS 号：1310583)。 5.1.8 硼氢化钾(KBH,,CAS 号：13762-51-1)。 5.1.9 胰蛋白酶(CAS 号：9002-07-7):酶活力≥2500 U/mg。 5.1.10 蛋白酶(protease XIV.CAS 号：9036060):酶活力≥3.5 U/mg。 5.2 试剂配制 5.2.1 甲酸溶液(10%):量取甲酸5.0 mL, 用水稀释定容至50 mL。 5.2.2 流动相(30 mmol/L磷酸氢二铵，0.5 mmol/L 四丁基溴化铵，5%甲醇，pH 6.0):称取磷酸氢二铵 3.96g、 四丁基溴化铵0.161 g,置于1000 mL 量筒中，加入水900mL, 搅匀，用甲酸溶液(5.2.1)调节溶液pH 至6.0,加入甲醇50mL, 用水定容至刻度。经0.45μm 尼龙滤膜过滤后，于水浴超声脱气30 min.备用。 2 NY/T 3947—2021 5.2.3 磷酸氢二铵溶液(30 mmol/L 磷酸氢二铵，pH8.0): 称取磷酸氢二铵3.96 g, 置于1000 mL量筒 中，加入水950 mL, 用甲酸溶