NY_T 914-2022 饲料中氢化可的松的测定.docx

0 1 实 0 1 实 施 65.120 B 46 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 914—2022 代替 NY/T 914—2004 饲料中氢化可的松的测定 Determination of hydrocortisone in feeds 2022-07-11 发布 2 0 2 2 - 1 0 - 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 914—2022 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替 NY/T 914—2004《饲料中氢化可的松的测定 高效液相色谱法》,与NY/T 914—2004 相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： a) 更改了方法的适用范围(见第1章，2004版的第1章); b) 更改了高效液相色谱法的检出限，增加了定量限(见第1章，2004版的第1章); c) 更改了原理的表述(见第4章，2004版的第3章); d) 增加了试样净化步骤(见4.5.2); e) 更改了检测波长(见,2004版的7.2.1); I) 增加了液相色谱-串联质谱法(见第5章)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。 本文件由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。 本文件起草单位：四川省饲料工作总站[农业农村部饲料质量监督检验测试中心(成都)]。 本文件主要起草人：张静、赵立军、李云、王宇萍、岳琴、晁娟娟、廖峰、程传民、蒋刘柱。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： —2004年首次发布的为NY/T 914—2004; ——本次为第一次修订。 工 NY/T 914—2022 饲料中氢化可的松的测定 1 范围 本文件规定了饲料中氢化可的松的高效液相色谱和液相色谱串联质谱测定方法。 本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中氢化可的松的测定。 本文件高效液相色谱法配合饲料、浓缩饲料、精料补充料的检出限为0.5 mg/kg, 定量限为1.0 mg/kg; 添加剂预混合饲料的检出限为1.0 mg/ kg, 定量限为2 .0mg/kg 。 液相色谱-串联质谱法配合饲料、浓缩饲 料、精料补充料的检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg;添加剂预混合饲料的检出限为4μg/kg, 定量限为 10 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 高效液相色谱法 4.1 原理 试样中的氢化可的松用甲醇提取，经石墨化炭黑固相萃取柱和氨基固相萃取柱净化，高效液相色谱仪 测定，外标法定量。 4.2 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.2.1 水 ：GB/T 6682,一级。 4.2.2 甲醇：色谱纯。 4.2.3 乙腈：色谱纯。 4.2.4 二氯甲烷：色谱纯。 4.2.5 淋洗液：甲醇+水=50+50。 4.2.6 洗脱液：二氯甲烷+甲醇=10+90。 4.2.7 30%乙腈溶液：30mL乙腈加水稀释至100mL, 混匀。 4.2.8 标准储备溶液(1.0 mg/mL): 准确称取氢化可的松标准品(CAS 号：50-23-7,纯度不低于97%) 50 mg(精确至0.01 mg) 于 5 0mL, 棕色容量瓶中，用甲醇溶解定容，混匀，于-18℃以下避光保存，有效期 为3个月。 4.2.9 标准中间溶液(100.0μg/mL): 准确移取标准储备溶液(4.2.8)10mL 于100mL棕色容量瓶，用 30%乙腈溶液(4.2.7)定容，于2℃~8℃避光保存，有效期为1个月。 4.2.10 标准系列工作溶液：准确移取适量体积的标准中间溶液(4.2.9),用30%乙腈溶液(4.2.7)稀释， 配制成浓度分别为0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL 的标准 系列工作溶液，混匀，于2℃~8℃避光保存，有效期为1个月。 2 NY/T 914—2022 4.2.11 石墨化炭黑固相萃取柱：500 mg/6mL, 或性能相当者。 4.2.12 氨基固相萃取柱：500 mg/6