GA_T 1964-2021CN 法庭科学 家猪STR复合扩增检验 毛细管电泳荧光检测法.docx

ICS 13.310 CCS A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T 1964—2021 法庭科学 家猪 STR 复合扩增检验 毛细管电泳荧光检测法 Forensic science—STR multiplex amplification examination methods for Sus scrofa f. domestica—Capillary electrophoresis and fluorescence method 2021-10-14发布 2022-05-01 实施 中华人民共和国公安部 发 布 I GA/T 1964—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC 179)提出并归口。 本文件起草单位：公安部物证鉴定中心、海口市公安局、南京森林警察学院、湛江市公安局。 本文件主要起草人：张颖、马温华、张瑾、金鑫、马艳君、刘开会、李万水、林大钧。 1 GA/T 1964—2021 法庭科学 家猪 STR 复合扩增检验 毛细管电泳荧光检测法 1 范围 本文件规定了通过复合扩增和荧光检测对家猪进行个体识别和亲子鉴定的检验原理、仪器试剂、操 作方法、结果判读和检验中的注意事项。 本文件适用于家猪基因组脱氧核糖核酸(DNA) 的 STR 分型检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GA/T 382—2014 法庭科学 DNA 实验室建设规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 短串联重复序列 short tandem repeats;STR 重复单位由2个～6个核苷酸构成，重复次数5～60多次的 DNA 片段，总长度多在400 bp 以下的 DNA 序列。 3.2 聚合酶链式反应 polymerase chain reaction;PCR 一种体外扩增特异性 DNA 片段的技术，可在数小时内获得近百万个目的 DNA 片段的拷贝。 3.3 引物 primer 人工合成的寡核苷酸序列，与目的片段两侧翼的序列互补，限定了聚合酶链式反应(PCR) 产物的长 度和特异性。 3.4 阳性对照 positive control 在实验设置中已知分型的 DNA 样本，主要用于监测 DNA 分型结果的可靠性和准确性。 3.5 阴性对照 negative control 在实验中设置的不含 DNA 样品的检验样本。 4 原理 家猪属于猪科、猪属的多胎高产哺乳动物，其STR 基因座遗传方式符合孟德尔遗传定律，可以联合 2 GA/T 1964—2021 应用多个 STR 基因座对其进行个体识别和亲子鉴定。 5 主要仪器设备 主要仪器设备包括： a) 漩涡振荡器； b) 水浴或干浴； c) 台式离心机； d) 扩增仪； e) 超净工作台； f) 遗传分析仪； g) 移液器。 6 主要试剂 主要试剂包括： a) 去离子水； b) PCR buffer; c) 热启动 Taq DNA 聚合酶； d) 氯化镁(MgCl?) 溶液； e) 脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs); f) PCR 扩增引物可参考表1合成； 表 1 家猪 STR 检验基因座名称和引物信息 基因座名称 染色体 引物序列(5- 3) 等位基因范围 分子量大小 bp SW240 2 p AGAAATTAGTGCCTCAAATTGG AAACCATTAAGTCCCTAGCAAA 14～23 88～106 PigSTR13E 13 p GTTAGTTTCAGGTAAACAGCAGAGTG AATCCAAACTTCGTGTGCTGTC 13～18.3 125～148 PigSTR15A 15 p TGGTGTTGGTTTGATCCTCA TCGGATTCTTTTCCCACCTA 11～20 185～221 S0655 7 p GTTGCTGTGTTGTAGGCTGGCAG TGGGGATGGGAGGGAGAGAATT 5～22 263～331 PigSTR11B 11 q CCATAGTTACTTCAACCCTAG CCACATTGGTTATCTAGATGG 5～17 83～131 PigSTR14A 14 p TGTTGCTGCTATGGGAATTG AAACCCTGCTTCTTTGGAGACAG 8～14 166～190 3