T_CI 029-2023 金疏基超分子多肽技术规程.docxVIP

目?次 前 ?? 言? .....................................................................? 3 金巯基超分子多肽技术规程? .....................................................? 4 1.? 范围? ......................................................................? 4 2.? 规范性引用文件? ............................................................? 4 3.? 金巯基超分子多肽? ..........................................................? 4 4.? 超分子多肽简介? ............................................................? 4 5.? 超分子多肽生产工艺? ........................................................? 4 6.? 超分子多肽定量制备方法? ....................................................? 5 2 金巯基超分子多肽技术规程 1.?范围 本文件规定了金巯基超分子多肽技术规程的制备技术要求，生产工艺及详细的制备方 法。 本文件适用于针对多肽类活性分子的超分子自组装递送系统。 2.?规范性引用文件 本文件无规范性引用文件 3.?金巯基超分子多肽 Au?sulfydryl?supramolecular?peptide 4.?超分子多肽简介 本文件中金巯基超分子多肽（Supramolecular?polypeptide）为分子式为 [Peptide-S-Au(I)］n?的超分子多肽，其结构式见图?1. 5.?超分子多肽生产工艺 5.1?Au-肽超分子多肽生产工艺?1 图?1?超分子多肽结构式 注 a)将多肽溶解在?NH2-PEG-SH?水溶液中，超声至多肽完全溶解，然后依次加入羟乙基哌 嗪乙烷磺酸和金加热搅拌反应至溶液由黄色泛白，得到?Au-肽前体； b)将羟乙基哌嗪乙烷磺酸、金、水混合加热搅拌至溶液变成紫红色，得到纳米金溶液； c)将步骤?1?所述?Au-肽前体与步骤?2?的纳米金溶液混合加热搅拌，反应?5-10?min?后， 最后加入适量的防腐剂，即得到超分子多肽。详见图?2。 注：所有的生产工艺均严格按照化工行业标准执行。 图?2?Au-肽前体超分子多肽生产工艺流程图 4 5.2?Au-多肽-SH?超分子多肽生产工艺?2?注 a)将金、多肽-SH?的水溶液混合； b)用氢氧化钠(或碳酸氢钠溶液、柠檬酸钠、柠檬酸钾)调节步骤?1?溶液的?pH?值，使之 保持在?6.0-7.0?之间； c)加入维?C?抗坏血酸，25℃下搅拌反应?1h，最后加入适量的防腐剂，制备得到超分子 多肽。详见图?3。 注：所有的生产工艺均严格按照化工行业标准生产规范执行。 图?3?Au-多肽-SH?混合超分子多肽生产工艺?2?流程图 6.?超分子多肽定量制备方法 6.1?Au-肽超分子多肽定量制备方法?1 a)将?2mg?多肽溶解在?NH2-PEG-SH?水溶液（4mg/mL）中，超声至多肽完全溶解，然后依 次加入羟乙基哌嗪乙烷磺酸和金加热搅拌反应至溶液由黄色泛白，得到?Au-肽前体； b)将?100?mM?羟乙基哌嗪乙烷磺酸(pH?7.0)、10mM?金、水混合加热搅拌至溶液变成紫红 色，得到纳米金溶液； c)将步骤?1?所述?Au-肽前体与步骤?2?的纳米金溶液混合在?50℃加热搅拌，反应?5-10?min 后，最后加入适量的防腐剂，即得到超分子多肽。 6.2?Au-肽超分子多肽定量制备方法?2 a)将?10mM?金、多肽（末端修饰巯基）（0.2mg/mL）的水溶液混合； b)用?6M?氢氧化钠（或碳酸氢钠溶液、柠檬酸钠、柠檬酸钾）调节步骤?1?溶液的?pH?值， 使之保持在?6.0-7.0?之间； c)加入?0.1M?维?C?抗坏血酸，25℃下搅拌反应?1h，最后加入适量的防腐剂，制备得到超 分子多肽。 5