[免疫学]第十二章 淋巴细胞活化的分子机制.pptx

第十二章 淋巴细胞活化的分子机制以及应答过程;第一节 细胞信号传递系统的分子基础;信使分子按其功能大致可分为三类：;第二节? 细胞信号传递过程中所涉及的酶 和接头蛋白;一、蛋白酪氨酸激酶;（一）非受体型PTK;;1．Lck p56lck是分子量为56kDa的单链分子，由509个氨基酸残基组成。 Lck分子结构可以分为四个功能区: ①膜接触区，位于N-端，N-端第2位Gly能结合豆蔻酸，通过豆蔻酸(myristic acid)与细胞膜内侧面相连； ②底物作用区，包括SH2和SH3结构域； ③激酶活性区，即SH1结构域，这一区域在氨基酸组成上与其它src家族成员高度同源。其中273位的赖氨酸（Lys）是ATP结合点，394位的酪氨酸（Tyr）为自身磷酸化位点； ④调节区，位于羧基端，与Lck激酶活性的调节有关。Tyr505是调节性磷酸化位点。;;;信号分子的特殊结构域——SH结构域：;;;4．Syk家族Syk家族有Syk和ZAP－70两个成员，二者结构相似，在N端有两个SH2结构域，C端有一个SH1激酶结构域。两个SH2结构域可与多种刺激性免疫受体胞浆区的活化ITAM基序结合，介导多种受体引起的细胞活化信号。Syk家族分子的激活一般晚于Src家族。（1）Syk Syk（spleen tyrosine kinase）表达于大部分造血细胞，B细胞表达水平最高。（2）ZAP-70 最早发现与TCR复合体中的CD3?链相关，所以称为?相关蛋白（?－associated protein, ZAP-70）。ZAP-70分子量为70kDa，主要表达在T细胞和NK细胞。;;（二）受体型PTK;;二、蛋白酪氨酸磷酸酯酶;（一）受体型PTP——CD45;;5．Ca2+浓度与CD45活化的关系 活化T细胞内酪氨酸磷酸化水平升高与细胞内钙离子浓度升高相关，推测高浓度钙离子可能对CD45具有负调控作用。 抗原同TCR结合，随后CD4和CD45发生共凝集，从而导致CD45介导的p56lck去磷酸化而活化，细胞内钙离子水平的突然升高又可灭活CD45，从而使二级底物发生短暂的酪氨酸磷酸化以及活化信号的传递；随后细胞内钙离子水平又回到最初的水平，CD45也从无活性状态中恢复过来， 使p56lck在Tyr394位点发生去磷酸化而灭活，以及其它能终止信号转导途径起始步骤中起关键作用的酶发生去磷酸化。;（二）非受体型PTP ;三、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶; （一）蛋白激酶C（PKC）;;;; （二）MAP激酶;;;2．JNK（c-jun N-terminal kinase） JNK是由与Ras平行的Rac-GTP途径激活的。Grb2连接Vav，Vav使Rac-GDP释放GDP，然后Rac连接GTP成为 Rac-GTP，通过MAP激酶的级联反应最终活化JNK，JNK使Jun蛋白磷酸化，Jun是AP-1的另外一个组成成分。 3．p38 激活p38的因素与JNK相似。活化的p38转位到细胞核内，作用于核内的转录因子，引起基因的转录。;;四、G蛋白和小G蛋白; （一）G蛋白;;;2．G蛋白的分子结构与分类 G蛋白属于一个庞大的三聚体同源蛋白家族，种类已多达40余种，大多数存在于细胞膜上，由α、β、γ三个不同的亚单位构成，总分子量为100kDa左右。其中β亚单位在多数G蛋白中都非常类似，分子量36kDa左右。γ亚单位分子量在8?11kDa之间，除Gt外，大多数G蛋白的γ亚单位都是相同的。 βγ两个亚单位结合紧密，只有当蛋白变性时才使之分开。各种G蛋白的差别主要在α亚单位， 根据α亚单位的不同可以将G蛋白分为Gs、Gi、Go、Gq、G?及Gt等六类。这些不同类型的G蛋白在信号传递过程各自发挥不同的作用。;;;;4．G蛋白偶联的信号系统（1）与腺苷酸环化酶相关的信号传递系统 Gs和Gi蛋白通过不同的机制激活或抑制细胞上的腺苷酸环化酶(AC)体系。腺苷酸环化酶可使ATP水解并环化生成cAMP。细胞内cAMP水平的改变及激活依赖于cAMP的蛋白激酶(PKA)。（2）与cAMP磷酸二脂酶相关的信号传递系统 该系统是与视觉信号传递有关的效应系统。?（3）与磷脂酶C相关的信号传递系统 磷脂酶C(PLC)是存在于细胞膜浆膜面上的一种关键酶类，有9种异构体，可分为α、β、γ和δ四组。在T细胞活化过程中，参与信号传递的主要为PLC-? 亚型。; （二）小 G 蛋白;; ;;2．Rac途径 Vav蛋白参与的Rac作用途径。Vav蛋白是c-vav基因的产物，分子中含1个SH-2结构和2个SH-3结构，还有1个亮氨酸拉链区、1个核定位信号序列。TCR发生交联后的T细胞以及经EGF-R、PDGF-R、IgE-R以及IgM-