药物分析液相色谱基础幻灯片.pptxVIP

会计学1 关于色谱色谱是一种分离工具，而不是传统意义上的分析仪器常见的分离方式：蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤等等色谱是其中一种分离工具第1页/共28页 色谱法简介色谱法（Chromatography）溯源俄国科学加1903年发现色谱的吸附原理，开创了应用吸附原理分离植物色素的新方法并见诸于俄文的文献1906年正式命名（见诸文献）色谱法；Chromatography50年代开始广泛研究和应用主要是气相色谱及薄层色谱高效液相色谱法的广泛应用始于70年代第2页/共28页 色谱的发明人俄国科学家：M. S. Tswett正式命名“色谱”的文献第3页/共28页 一、色谱起源石油醚碳酸钙颗粒色素玻璃柱经典液相色谱第4页/共28页 色谱分离的机理分离是一个物理的过程流动相（Mobile Phase）固定相（Stationary Phase）样品（溶解于流动相中的溶质）第5页/共28页 什么是液相色谱气相色谱：流动相是气相液相色谱：流动相是液相第6页/共28页 什么是高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography高效液相色谱法，简称：HPLC是一种区别于经典液相色谱；基于仪器方法的高效能分离手段：高性能的色谱柱，高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器……广泛应用于各个领域：医药 / 环保 / 石化 / 生命科学 / 食品及农业……在技术，理论及应用上仍处于发展阶段第7页/共28页 液相色谱的基本流程图流动相 泵色谱柱检测器 泵输液分离 检测 记录AEGBCDF进样阀进样第8页/共28页 HPLC的仪器配置色谱泵自动进样器色谱柱及柱温箱检测器数据处理系统溶剂第9页/共28页 HPLC的应用在食品研究中的分析应用食品中的天然成分碳水化合物类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂颜料和染料（色素〕维生素污染物霉菌（黄曲霉毒素〕农药和兽药残留多环芳烃（PAHS〕和亚硝酸第10页/共28页 HPLC的应用在兽药研究中分析应用在医药研究中分析应用 药物分析有USP、BP、CP等标准常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。 第11页/共28页 HPLC 的应用在生物化学和生物工程中的应用氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（儿茶酚胺类) 在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析 第12页/共28页 HPLC的应用在公安、刑警破案工作需要毒品分析等在环境污染分析中的应用废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留、酚类和胺类的检测 ************************************* 2004年获悉，世界上化合物总数达到4700万，其中绝大部分是有机化合物，而大约有70％以上是不挥发的。对HPLC来说，只要被分析物质在流动相溶剂（各种各样〕中有一定的溶解度便可分析。所以，HPLC在各行各业有着广泛的应用潜力。第13页/共28页 高效液相色谱基本概念第14页/共28页 色谱图：HPLC图形结果（Chromatogram）色谱图即色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图，其纵坐标为信号强度，横坐标为保留时间。← 色谱峰保留时间（分）基线↓峰高峰宽响应值第15页/共28页 液相色谱图相关术语色谱峰 － Peak色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号的微分曲线峰底 － Peak Base峰的起点与终点之间连接的直线峰高 － Peak Height峰最大值到峰底的距离峰宽 － Peak Width在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离半（高）峰宽 － Peak Width at Half Height通过峰高的中点作平行于峰底的直线，其与峰两侧相交两点之间的距离第16页/共28页 液相色谱图相关术语峰面积 － Peak Area峰与峰底之间的面积,又称响应值标准偏差；σ － Standard Error0.607倍峰高