青稞中直链淀粉和支链淀粉含量的测定 双波长分光光度法.docVIP

青稞中直链淀粉和支链淀粉含量的测定 分光光度法 范围 本文件规定了青稞中直链淀粉和支链淀粉含量的测定——双波长分光光度法的术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、分析步骤、结果计算、结果表示和精密度。 本文件适用于青稞中含量大于0.75 g/100g直链淀粉、含量大于0.49 g/100g支链淀粉的测定。 其他植物源性食品中粮食作物包括麦类粮食（小麦、燕麦）、粗粮类粮食（玉米、藜麦）、豆类粮食（蚕豆、豌豆）、薯类粮食（马铃薯）中直链淀粉和支链淀粉的测定可参照本文件执行。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20264 粮食、油料水分两次烘干测定法 GB/T 21305 谷物及谷物制品水分的测定 常规法 术语和定义 3.1 直链淀粉 amylase 是α-D-吡喃葡萄糖基以α-1,4-糖苷键连接成无分支的螺旋结构的多聚糖大分子。 3.2 支链淀粉 amylopectin 是α-D-吡喃葡萄糖基以α-1,4-糖苷键连接成直链并以α-1,6-糖苷键连接有支链的螺旋结构的多聚糖大分子。 原理 直链淀粉和支链淀粉与碘试剂作用分别产生蓝色和紫红色的淀粉碘包合物，在测定波长和参比波长分别在624 nm和425 nm处测定直链淀粉碘包合物的吸光度值，在测定波长和参比波长分别为536 nm和750 nm处测定支链淀粉碘包合物的吸光度值，其各自两个波长的吸光度差值与该溶质浓度成正比。因此，通过各自两个波长的吸光度差值分别求得直链淀粉和支链淀粉的含量，二者之和即为总淀粉含量。 5 试剂和材料 5.1 试剂 5.1.1 氢氧化钠：分析纯。 5.1.2 盐酸：分析纯。 5.1.3 碘化钾：分析纯。 5.1.4 碘：分析纯。 5.1.5 无水乙醇：分析纯。 5.1.6 实验用水：应符合GB/T 6682规定的三级水要求。 5.2 标准品 5.2.1 直链淀粉标准品：来源于马铃薯淀粉，纯度≥98 %。 5.2.2 支链淀粉标准品：来源于马铃薯淀粉，纯度≥98 %。 5.3 试剂配制 5.3.1 氢氧化钠溶液（1 mol/L）的配制 称取40 g氢氧化钠固体（准确至±0.001 g），加水溶解，转移至1000 mL容量瓶中，混匀，定容。 5.3.2 盐酸溶液（0.1 mol/L）的配制 移取1.0 mL盐酸至100 mL容量瓶中，加水稀释，混匀，定容。 5.3.3 碘试剂的配制 称取2 g碘化钾（准确至±0.001 g），加入水以形成饱和溶液，再加入0.2 g碘（准确至±0.001 g），待碘全部溶解后转移至l00 mL容量瓶中，混匀，定容。现配现用，避光保存。 5.4 标准溶液的配制 5.4.1 直链淀粉标准溶液（1.0 mg/mL）的配制 称取25.0 mg直链淀粉标准品（准确至±0.1 mg），置于25 mL烧杯中，加入10 mL 1 mol/L氢氧化钠溶液，加热煮沸溶解分散5 min，冷却至室温，转移至25 mL容量瓶中，烧杯用水洗涤3次后一并转移至该容量瓶中，定容至刻度，摇匀。 5.4.2 支链淀粉标准溶液（1.0 mg/mL）的配制 称取25.0 mg支链淀粉标准品（准确至±0.1 mg），置于25 mL烧杯中，以下按“5.4.1”要求进行操作。 6 仪器和设备 6.1 分析天平：感量为±0.0001 g和±0.001 g。 6.2 分光光度仪：具有1 cm比色皿，可在400 nm ~ 900 nm范围内测量吸光度。 6.3 pH计：精度为0.01。 6.4 涡旋混合器：旋速≥2800转/分。 6.5 超声波清洗机：频率40 KHz，最大超声波功率360 W。 6.6 电子调温万用电炉：最大功率2 KW。 6.7 台式离心机：最大容量56 mL，转速4000 ~ 16500 r/min。 6.8 食物粉碎机：可将固体样品粉碎并通过150 μm（100目）筛。 6.9 容量瓶：25 mL、100 mL、1000 mL。 7 分析步骤 7.1 试样制备 7.1.1 样品预处理 称取0.5 g（准确至±1 mg）已粉碎过100目筛的青稞样品，置于150 mL三角瓶中，加入2.5 mL无水乙醇，涡旋以润湿样品。 7.1.2 样品溶液的制备 样品润湿后加入10 mL 1 mol/L氢氧化钠溶液，涡旋混匀1 min，超声分散30 s，置于电炉加热煮沸40 min。冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中，三角瓶用水洗涤3次后一并转移至该容量瓶中，定容至刻度，摇匀，以8000 r/