血涂片制备与染色.pptVIP

【染色结果评价】 正常情况：血膜外观呈淡琥珀色。在显微镜下红细胞染成粉红色，在厚薄均匀处略有碟状感。白细胞胞质中的颗粒能显示出各种细胞的特有色彩，细胞核染紫红色，核染色质结构清楚。 染色环境偏酸：则红细胞和嗜酸性颗粒偏红，白细胞核呈浅蓝色或不着色，染色过酸pH3.5时，则呈现一片红色，白细胞中除嗜酸性颗粒外均不着色。 染色环境偏碱：则所有细胞呈灰蓝色，微偏碱者红细胞暗红、白细胞颗粒深暗。嗜酸性颗粒可染成暗褐色甚至黑紫色或蓝色。中性颗粒也偏粗染成紫黑色，血膜过厚的地方呈绿色。 第三十页，编辑于星期五：二十点 十三分。 （二）姬姆萨染色法 [原理] 吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结 果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差。 第三十一页，编辑于星期五：二十点 十三分。 吉姆萨染料 1.0g 甘油 66.0ml 甲醇（AR） 66.0ml [染色方法] 1. 甲醇固定干燥血膜3-5min 2. 将血膜在染液中浸染10-30min 3. 流水冲洗,待干后镜检 [试剂] 第三十二页，编辑于星期五：二十点 十三分。 （三） 瑞氏-吉姆萨染色 【原理】 将瑞特染料和吉姆萨染料按一定比例混合后对细胞进行染色，其染色原理同瑞特和吉姆萨染色法，但染色效果更佳，因为其综合了瑞士和吉姆萨染色法的优点。 第三十三页，编辑于星期五：二十点 十三分。 【瑞氏-吉姆萨染色试剂】 瑞特染料 1.0g 吉姆萨染料 0.3g 甲醇 加至500ml 先将瑞特染料和吉姆萨染料充分研磨混匀，甲醇溶解倒入容器中，未溶解完的继续加入甲醇研磨，重复多次，最后把染液加至500ml。 第三十四页，编辑于星期五：二十点 十三分。 [瑞氏-吉姆萨染色方法] 血片滴加染液5滴盖满血膜，2min后加入pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液（同瑞氏染液）缓冲液10滴，10min后用流水冲洗干净，待干后镜检。 第三十五页，编辑于星期五：二十点 十三分。 血液一般检验 第一页，编辑于星期五：二十点 十三分。 复习 血液标本采集和抗凝剂选择 血标本： 全血：血细胞+血浆;临床血液学检查，血细胞计数、分类和形态 学检查 血浆：全血除去血细胞；血浆病理性和生理性化学成分的测定，内分泌激素、凝血因子（钙除外）、血栓和止血检查 血清：离体后血液自然凝固后析出的液体成分（除纤维蛋白原等凝血因子）；临床化学和临床免疫学检查，可见血浆与血清的主要区别是，血清中不含纤维蛋白原。 第二页，编辑于星期五：二十点 十三分。 一、采血方法 静脉采血法 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背、内踝、股静脉，幼儿可采用颈外静脉采血 注意事项:抽血时只能外抽不能内推，以免形成空气栓塞 第三页，编辑于星期五：二十点 十三分。 第四页，编辑于星期五：二十点 十三分。 部位：WHO推荐中指或无名指尖内侧为宜，耳垂采血受温度影响大；半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定。 采血步骤及注意事项：应严格实行一人一针制；穿刺的深度的适当，切忌用力挤压，以免混入组织液，影响检验结果。用消毒干棉球擦去第一滴血，以后流出的血液可以使用。 皮肤采血法（毛细血管采血法） 第五页，编辑于星期五：二十点 十三分。 二、抗凝剂选择 抗凝：用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固 抗凝剂：能够阻止血液凝固的物质，称抗凝剂 第六页，编辑于星期五：二十点 十三分。 乙二胺四乙酸（EDTA）盐 抗凝原理：螯合钙离子 使用方法：15g/L浓度EDTA 和血液 1：10 适用范围：血细胞形态、血小板计数。但影响血小板聚集和白细胞吞噬功能所以不适合做凝血象检验及血小板功能试验 第七页，编辑于星期五：二十点 十三分。 草酸盐 （sodium oxalate） 草酸钠 、草酸钾、草酸铵 原理：草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固 用范围： 凝血象检查 第八页，编辑于星期五：二十点 十三分。 肝素（heparin） 原理：低浓度时抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成,还能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用；高浓度时阻断凝血酶和纤维蛋白的反应 适用方