《检验仪器维修与使用》微生物及细菌分析.ppt

第九章 微生物及细菌分析;; 血液标本（无菌采集） 增菌培养;净化工作台 生物安全柜;5;6;标本取材用品;培养基;鉴定卡、药敏卡3;鉴定卡、药敏卡4;血培养检查概述;血培养检测的方法;微生物鉴定系统概念;药敏试验测试方法;新检测方法;微生物及细菌基础知识;;细胞壁 位于细菌细胞膜的外层，主要功能是保护细胞，不易受渗透压变化而破裂，维持细胞外型。细胞壁的主要成分是肽聚糖。革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的细胞壁结构比较如下表：;细菌的结构——基本结构; ;细菌的结构——基本结构;细菌的结构——基本结构;细菌的结构——特殊结构;; ;碳水化合物： 用于合成菌体的含碳化合物及其骨架，也是细菌的能源。 有机氮： 是组成细菌细胞的蛋白质、核酸及其它含氮物质的主要成分。 维生素及其他营养物质： 是细菌生长所必需的、但需要量很少本身又不能合成的一类有机物质，如维生素、嘌呤和嘧啶碱、氨基酸等。;细菌的生长和繁殖;细菌的生长期;对气体的需求; 临床微生物检验设备;;主要功能 检测标本中是否有微生物存在，计算机自动扫描进行连续监测，当微生物生长代谢导致某些生长指数超标时，仪器自动报警提示有细菌生长。;主要功能 将培养基上分离的可疑致病菌配制成纯菌液，放入自动微生物鉴定及药敏分析系统中，通过计算机自动扫描、读数、分析、最后报告鉴定及药敏结果。 ; 通过自动监测培养基（液）中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化，定性地检测微生物的存在。 ;;;临床常见的血培养瓶 1;;;功能 培养瓶放入仪器后进行恒振荡温培养及自动连续监测。不同类型自动血培养系统的单机检测样本数有所不同，一般为数十至数百个。监测数据传送至数据管理系统，一旦系统分析显示某一培养瓶达到阳性判断标准时，培养仪将会给予提示信息。 ;临床常见的血培养仪;;功能 收集并分析来自培养仪的数据，以及将患者和培养瓶的资料存入数据库。在不使用数据管理系统时，系统处于监视状态并出现监视屏幕。当需要患者及培养资料时，进入系统主菜单。???据管理系统可根据各实验室的要求追踪大量的信息，可保存基本或详尽的资料（如患者检验号，培养瓶号，标本类型以及实验室自己设置的一些特殊项目资料），也可根据病区、微生物类型及时间追踪分析结果。一般还可给出工作量报告。 ;;;恒温孵育系统设有恒温装置和震荡培养装置。系统根据 培养瓶支架的数量分为50瓶，120瓶，240瓶等等。培养 瓶在系统中保持恒温并持续摇动同时不断地进行检测。 放射性碳14标记法： 存在于待测标本中的活菌接种 在含生长培养基及14C 底物的BACTEC培养瓶中，活菌 将利用标记底物而产生14CO2 ，BACTEC仪将不断检测培 养瓶中的放射性气体，当14CO2量超过规定界限时报告阳 性生长。反应过程： 14C-底物——中间产物+CO2+14CO2+其他终末产物;全自动血培养仪基本原理（2）;二氧化碳感受器：微生物在生长过程中的代谢产生CO2经由培养瓶底部的半透性薄膜传至含有荧光剂的感应器。 CO2 改变感应器中 pH 值，促使感应器释放荧光物质。荧光物质释放的強度随着CO2的浓度而成正比增加。仪器检测荧光信号的变化，运算得出荧光信号变化的各种参数数据，从而判断培养瓶内是否有微生物生长。; 均质荧光技术：在液体血培养基内含有发荧光物质的分子。在孵育时，微生物生长代谢过程中产生质子(使培养基变酸)、电子(使培养基还原)和各种带电荷的原子团(例如在液体培养基内CO2变成HCO3-)。 发荧光的分子接受了这些物质，从而改变自身结构成为不发荧光的化合物。也就是荧光的強度随着细菌的生长增加而减少。; 均质荧光技术： 一个独特的光学系统，可以检测每个培养瓶的荧光 变化，这就是“均质荧光技术”。只要其中一个变化被检 出，即可认为有细菌存在。 由于“均质荧光技术” 是在血液培养瓶內直接添加了 荧光分子，使其直接与检体中的细菌接触，从而可以快 速检测培养瓶中的任何一微生物的生長变化。;;;包括9240型(240瓶)、 9120型(120瓶)和 9050型(50瓶)三种。 荧光探测技术连续 测定封闭培养瓶内 微生物代谢引起的 O2或CO2浓度变化 以检测是否有微生 物生长繁殖。;全自动连续检测， 速度快、准确性高。 阳性标本平均检出 时间9．65小时， 88．9％阳性标本 检出时间为20小时。 假阳性率低于0.5％, 系统安全可靠。 ;放射性碳14标记法 检测器抽取和分析 培