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ELISA实验基础知识培训 ppt课件 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 第二部分 酶联免疫吸附实验（ELISA） 定量检测应用 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 ELISA实验基础知识培训 国际法规对生物分析方法验证的要求 双抗夹心ELISA检验方法实例和验证介绍 ELISA分析模型的选择 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 Guidance for Industry Bioanalytical Method Validation U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration (FDA) Center for Drug Evaluation and Research (CDER) Center for Veterinary Medicine (CVM) May 2001 FDA对生物分析方法验证的要求 Typical method development and establishment for a bioanalytical method include determination of (1)selectivity, (2) accuracy, precision, recovery, (3) calibration curve, and (4) stability of analyte in spiked samples 生物学分析方法的验证项目包括：（1）专属性；（2）准确度、精密度、回收率；（3）标准曲线；（4）稳定性 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 ELISA实验基础知识培训 2016.1.2 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 1. 酶联免疫吸附实验（ELISA）基本原理及概念 2. 酶联免疫吸附实验（ELISA）定量检测应用 3. ELISA实验主要设备—移液器基本使用 主要内容 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 第一部分 酶联免疫吸附实验（ELISA）基本原理及概念 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 免疫技术 酶促反应 抗原 抗体 酶 底物 酶标抗原或酶标抗体 酶联免疫吸附试验 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 什么是抗原？ 能刺激机体免疫系统并启动机体的免疫应答，且能与其免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞)特异性结合，引起一系列生物学效应的物质。 免疫系统 抗原 特异性抗体 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 抗原的特点 免疫原性和抗原性 免疫原性 指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答(产生特异性抗体及免疫效应细胞)的性质。 抗原 入侵 记忆细胞（对抗原有记忆功能） 浆细胞 特异性抗体 效应B细胞 活化分裂 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 抗原性 指抗原分子与免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞)发生特异性结合的性质。 抗原失去致病能力 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 抗原决定簇大多存在于抗原物质的表面，有些存在于抗原物质的内部，须经酶或其他方式处理后才暴露出来。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大，决定簇的数目越多。 抗原决定簇： 抗体识别相应抗原并与之结合的位点 抗原决定簇 抗原决定簇 具有两个以及两个以上抗原决定簇的抗原叫多价抗原 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 哪些物质可以称之为抗原呢？ 大多数蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素等都是抗原。 可以引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染 金黄色葡萄球菌 常引起严重腹泻和败血症 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 病毒呈球形，衣壳由60个壳微粒组成，呈20面体立 体对称，有HAV的特异性抗原(HAVAg)，每一壳微粒由4种不同的多肽（蛋白质）即VP1、VP2、VP3和VP4所组成 甲肝病毒 1973年Feinslone 首先用免疫电镜技术在急性期患者的粪便中拍摄的甲型肝炎病毒 (Hapatitis A virus,HAV )? 2021/3/26 ELISA实验基础知识培训 ppt课件 甲肝病毒表面的VP蛋白是具有免疫原性的蛋白，能刺