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第四章 食品微生物检验的一般程序第1节 微生物学检验实验室的规则及注意事项第2节 微生物检测实验室的设施与设备验证第3节 食品微生物检验的一般程序第一节 微生物学检验实验室的规则及注意事项一、微生物学及微生物学检验实验室的规则二、实验室意外的紧急处理办法一、微生物学及微生物学检验实验室的规则 在进行微生物学实验时,须时刻牢记实验的对象是病原微生物,任何疏忽都可能导致严重的后果,不仅自身有可能招致感染,且有可能将病原微生物传给他人。因此决不能有丝毫侥幸心理,冒任何不必要的危险。进入实验室时必须遵守下列规则。(1)进实验室时必须穿白大衣.离室时脱下反折,白大衣要经常清洗消毒。(2)每次实验后均要用肥皂洗手,必要时用消毒药水泡手。(3)书包、衣物等勿带入实验室,必要的文具、实验指导、笔记等带入后,放在指定的地方。(4)每次实验后均用消毒药水擦洗工作台面,并用紫外线灯照射过夜。(5)在实验室内不准吃东西、喝饮料和吸烟,不可把任何东西放入嘴中,也不要用手抚摸头面等部位。(6)进入实验室要保持安静,禁止高声谈活,不准打闹嘻笑。(7)必须按照指定的方法,小心地处理传染性材料、培养物和污染的物质,要正确地使用存放污染器材的各种消毒容器。(8)接种环使用前后必须进行烧灼灭菌。(9)必须小心地避免任何有菌材料的溅出,若不慎污染了工作台、手、眼、衣服和地面等处,应立即报告老师,以便及时作适当处理。(10)培养物和传染性材料须放在工作台的安全部位,尽可能保持台面的清洁整齐。(11)爱护公物,合理使用实验材料和器材,如不慎损坏了某些器具,应及时报告老师,听候处理。(12)实验完毕后清理台面,将需培养的标本及时故入培养箱。关闭水、电、煤气和门窗后离开实验室。二、实验室意外的紧急处理办法(1)皮肤破损:先除去异物,用蒸馏水或生理盐水洗净后,涂2%红汞或2%碘酒。(2)烧伤:局部涂凡士林、5%鞣酸或2%苦味酸。(3)化学药品腐蚀伤:若为强酸,先用大量清水冲洗,再以5%碳酸氢钠溶液洗涤中和,强碱腐蚀伤时先以大量清水冲洗后,再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗涤中和。若受伤处是眼部,经过上述步骤处理后,再滴入橄榄油或液体石蜡1~2滴。(4)菌液误入口中:应立即吐入消毒容器内,并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口;并根据菌种不同,服用抗菌药物预防感染。(5)菌液流洒桌面:将适量2%~3%来苏尔或0.1%新洁儿灭倒于污染面,浸泡半小时后抹去。若手上有活菌,亦应浸泡于上述消毒液3分钟后,再用肥皂和水清洗。(6)火警:如发生火警疫情时须沉着处理,切勿慌张,应立即关闭电闸和煤气阀门。如酒精、乙醚、汽油等有机溶液起火,切忌用水扑救,可用沙土等扑灭火苗。第二节 微生物检测实验室的设施 微生物检测实验室的设施与设备是开展微生物检测的物质基础和保证。因此开展微生物检测实验,离不开实验室设施与设备。但光有实验室设施与设备,而没有对实验室设施与设备的性能进行检测的验证,同样起不到保证作用。一、微生物检测实验室的设施与设备①保证检测的无菌环境设施与器械:如洁净室(无菌室)、无菌隔离系统、净化工作台等;②保证检测用实验用品与用具的无菌(灭菌)设施或设备:如高压蒸汽灭菌器、电热恒温干燥箱等;③保证检测细菌内毒素反应的器械用具:如各种细菌内毒素反应测定仪;④保证检测中微生物能恒温生长与菌种保存的恒温设备:如恒温培养箱、冰箱;⑤各种实验操作所用仪器:全封闭薄膜过滤装置、电动匀浆仪、电热恒温水浴箱、离心机、天平、显微镜等;⑥实验操作所用的玻璃器具:各种刻度吸管、移液管、容量瓶、试管、三角烧瓶、双碟培养皿等常用玻璃器具;⑦测量样品中微生物菌落数或其他有关测量仪:如空气浮游菌采样器、空气悬浮粒子计数器等。二、洁净室(无菌室) 洁净室(无菌室)是微生物检测的重要场所与最基本的设施。它是微生物检测质量保证的重要物质基础。因此它的设计要按国家标准—2001《洁净厂房设计规》、国家药品监督管理局颁发的《药品检验所实验室质量管理规范(试行)》中第十八条规定执行。微生物实验室洁净室的施工、安装、验收应按国家行业标准JGJ71—1990《洁净室的施工及验收规范》执行。对于微生物检测工作者和使用管理者来讲,更大量的工作是进行正常管理到日常的使用。 洁净室(无菌室)的标准要符合GMP洁净度标准要求。具体级别标准见下表。1、我国GMP(good manufacturing practice,良好操作规范)实施指南提出的洁净室(无菌室)级别空气洁净度(级别)≥0.5μm的微粒数(个/m3)≥ 5 μm的微粒数(个/m3 )沉降菌(90mm皿,沉降0.5h) (菌落/皿)浮游菌(个/m3)100≤35000≤1≤51万≤350000≤2000≤3≤10010万≤3500000≤20000≤10≤50030万≤1
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