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实验内容;实验一 显微镜使用及微生物观察;三、实验步骤 1.显微镜的取送:①右手握镜臂;②左手托镜座;③置于胸前。 2.显微镜的旋转:①镜筒朝前,镜臂朝后;②置于观察者座位前的桌子上,偏向身体左侧,便于左眼向目镜内观察;③置于桌子内侧,距桌沿5cm左右。 3.对光:①转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐上升,然后转动转换器,使低倍物镜对准通光孔;②用手指转动遮光器(或片状光圈),使最大光圈对准通光孔,左眼向目镜内注视,同时转动反光镜,使其朝向光源,使视野内亮度均匀合适。 ; 4.低倍物镜的使用:①用手转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐下降,同时两眼从侧面注视物镜镜头,当物镜镜头与载物台的玻片相距2~3mm时停止。②用左眼向目镜内注视(注意右眼应该同时睁着),并转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐上升,直到看清物象为止。如果不清楚,可调节细准焦螺旋,至清楚为止。 5.高低倍物镜的使用;6.油镜的使用: A、将标本片放载物台上,用标本推进器固定,将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的位置,然后提高镜筒,在标本的待检部位滴香柏油一滴,再换油镜观察。 B、转动粗调节器使载物台徐徐上升(或使镜筒渐渐下降),直至油镜头浸没至油中。此时眼睛应从侧面观察,以免压碎标本片和损坏镜头。 C、然后双眼移至接目镜,一面从接目镜观察,一面反方向缓慢地转动粗调节器(下降载物台,或上升镜筒),当出现模糊物象时,换用细调节器,转动至物象清晰为止。 D、观察完毕,应先提高镜筒,并将油镜头扭向一侧,再取下标本片。油镜头使用后,应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。若镜油粘稠干结于镜头上,可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头,并随即用干的镜纸擦去残存的二甲苯,以免二甲苯渗入,溶解用以粘固透镜的胶质物,造成镜片移位或脱落。 ;7.镜头的擦拭:①用专门的擦镜纸;②擦镜头时,先将擦镜纸折叠几次,然后朝一个方向擦,不可来回擦或转动擦;③如果镜头被油污污染,则可在擦镜纸上滴几滴二甲苯,然后按上述方法擦拭。 8.显微镜的放大对象:是物体的长和宽,不是面积,更不是体积。 9.显微镜的焦距问题:物镜离装片的远近,准焦螺旋的使用。 10.显微镜使用时物象移动方向:相反,即物象在视野何方,则装片即向该方向移动。;11.显微镜使用时异物的判断:目镜、物镜或装片上,通常通过移动玻片(是否在玻片上),转动转换器(是否在物镜上)来判断,剩下在目镜上。 12. 实验后显微镜的安置:显微镜使用完毕后,应将玻片取下,将其机械部分用白纱布擦拭干净;转动转换器,让两个物镜偏于两旁;转动粗准焦螺旋,使镜筒下降至最低点,将反光镜竖起,蒙上红绸布,然后将显微镜锁入箱内 ;13.显微镜的保养 ①避免直接在阳光下曝晒 ②避免和挥发性药品或腐蚀性酸类一起存放 ③透镜要用擦镜纸擦拭或醮二甲苯擦拭 ④不能随意拆卸显微镜,尤其是物镜、目镜、镜筒不能随意拆卸 ⑤避免用手指沾抺镜面 ⑥显微镜放在干燥处 ;四、实验结果 名称 形态 大小 大肠杆菌 杆状 (0.5~1.0)μm×(1~5)μm 五、注意事项 1.用显微镜观察微生物不清楚时,可对光圈(强大、弱小)、滤光片、聚光器进行调节。 2. 细调时可先微微向一个方向调节,如果物像越变越清晰则继续朝原方向调节,反之逆向调节 六、思考题 使用油镜时,为什么先要用低倍镜观察?;实验二 培养基的制备 ;二、实验器材 (1)药品和试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、10%NaOH溶液、l0%盐酸溶液、琼脂。 (2)器材:小烧杯、天平、牛角匙、1000mL刻度烧杯、玻棒、pH试纸、试管、棉花、三角烧瓶 。; 三、方法与步骤 1、乳糖蛋白胨培养基的配制 (1)培养基配方: 牛肉膏3.0g 蛋白胨10.0g、乳糖5g,NaCl5.0g、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml、自来水1000mL、pH7.2—7.4。 (2)操作步骤: 1)称药品 按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离,立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。 ;2)加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中,再加热融化,此过程中.需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。 3)调pH 检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加1滴10%NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。若偏碱,则用10% HCl进行调节。应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度。;4)过滤 液体培养基可用滤纸
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