植保学科普通病理学实验五 植物病毒及其所致病害和科赫氏法则验证实验.pdfVIP

实验五 ： 植物病毒及其所致病害和柯赫氏法则验证实验I 实验六： 柯赫氏法则验证实验II-病原物的纯化 实验七： 植物寄生性线虫和柯赫氏法则验证实验III-病原 物的接种 实验八： 寄生性种子植物和雨滴飞溅传播的真菌孢子着 落及分布模拟 撰写完整的实验报告： 1、实验题目、实验原理、实验材料及仪器、 实验步骤、结果与分析、思考题 2、随最后一次作业附上一份实验课心得 考试： 操作考试分+笔试成绩+平时成绩 （实验报告） 选择 填空 简答题 实验目的： 1、学习认识植物病毒病的症状类型和病毒粒子特征 2、了解植物病毒的传播方式 3、掌握植物病毒机械摩擦接种方法 甜菜坏死黄脉病毒 甜菜曲顶病毒 甜菜黑色焦枯病毒 甜菜黄化病毒 番茄斑萎病毒 黄瓜花叶病毒 烟草花叶病毒 番茄斑萎病毒侵染不同的寄主 云南省农业生物技术重点实验室 董家红 黄瓜绿斑驳病毒侵染天然寄主/实验室鉴别寄主 黄瓜 西瓜 苋色黎 本生烟 介体传播： 各种昆虫、螨类、菟丝子 真菌、线虫 非介体传播： 机械传播、无性繁殖材料和嫁接 种子和花粉 大麦黄条点花叶病毒 细胞质弹状病毒属 大麦 灰飞虱传水稻黑条矮缩病毒(RBSDV) 灰飞虱传的水稻黑条矮缩病毒近年来严 重威胁我国水稻和玉米生产 灰飞虱在东亚地区的长距离迁飞 辽宁, 2009, 2011 朝鲜 韩国, 2007, 2008 日本关东 江苏 日本九州, 2008- 2011 烟草脆裂病毒 烟草脆裂病毒属 毛刺线虫 玉簪 甜菜坏死黄脉病毒 甜菜坏死黄脉病毒属 甜菜多粘菌 机械摩擦 机械传染病毒的接种方法，一般是将病株汁液在叶面摩擦， 所以又称 “汁液传染”或 “汁液摩擦传染”。 只限于大部分引致花叶型症状的病毒，因为这些病毒在寄主 细胞中的浓度较高同时其体外存活期也较长。 实验材料 1. 烟草健康植株 （普通烟/心叶烟/珊西烟） 2.TMV毒源 （病毒粒子\病叶） 3. 800目金刚砂 （碳化硅）、硅藻土、研钵等 （目是指每平方英寸筛网上的空眼数目，800 目就是指每平方英寸上的孔眼是800个，目数 越高，孔眼越多，粒径越小。） 1.先用肥皂将手彻底洗净， 2.取病叶5分硬币大小3块，放入研钵中，磨碎挤出汁液; 磷酸缓冲液 3.在接种寄主上喷撒少许金刚砂，以左手托着叶片，用右手食 指蘸取少量病毒汁液。在接种叶片上轻轻摩擦，要求仅使叶片 表皮细胞造成微伤口而不死亡; 4.接种5分钟后用清水洗去接种叶片上的残留物;用吸水纸吸干 残液。做好标记！ 5.将接种的植株放在防虫的温室或纱笼中，在18-25℃条件下 培养，3-7日内随时注意观察其发病情况。