实验常用培养基及基本特性.pdfVIP

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常用及基本特性 1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640 广泛应用于、特殊、正常或恶性增生的,的培养,是目前应用十分广 泛的。主要用于悬浮。其它像 K-562 、HL-60 、Jurkat 、Daudi 、IM-9 等成、细胞 以及HCT-15 等均可参考使用。 2、Minimum Essential Medium (MEM ) 也称最低必需,它仅含有 12 种、和 8 种维生素。成分简单,可广泛适应各种已 建成和不同地方的类型的培养。MEM-Alpha 一般用于培养一些难培养细胞类型, 而其它没有特殊之处的则几乎均可采用 MEM 来培养。 3、DMEM-高糖 (标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多培养,更 适合高密度悬浮。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的,也可用 于中和 DNA 的的培养。 4、DMEM-低糖 (标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多培养。 低糖适于依赖性贴壁,特别适用于生长速度快、附着性较差的培养。 5、DMEM/F12 DMEM/F12 培养基适于克隆密度的培养。F12 培养基成分复杂,含有多种,和 DMEM 以 1:1 结合,称为 DMEM/F12 培养基(DME/F12medium ),作为开发 无血清配方的基础,以利用 F12 含有较丰富的成分和 DMEM 含有较高浓度的营 养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳。为了增强该培养基的 缓冲能力,改良之一是在 DMEM/F12 (1:1)中加入 15mMHEPES。 6、McCoy’s 5A McCoy’s 5A Medium 主要为细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、 肺和等)的原代的生长,除适于一般的培养外,主要用于作组织活检培养、一些 培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen 、人、HT-29 、BHL-100 等。 7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM) Guilber 和 Iscove 将 Dulbecco’Medium 改良为 Iscove’s Medium ,用于培养和前 体。此种含有硒、额外的和维生素、和 HEPES 。并用取代了。IMDM 还能够促 进,LPS 刺激的,骨髓,T 细胞和细胞的生长。IMDM 为营养非常丰富的,因此 可以用于高密度细胞的快速。 8、M-199 Medium 1950 年,Morgan 成功研制出具有确定化学成分的细胞,即 M-199 ,主要用于培 养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199 可用于培养多种种属来源 的细胞,并能培养的细胞。 9、Leibovitz Medium () 培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在 CO2 缺乏的情况下培养株。此培 养液采用缓冲体系,组成进一步改良,并由替代了。 10、Ham’s F-10 培养基:适应细胞、人类的培养。 11、Ham’s 培养基:可以在加入很少血清的情况下应用,特别适合和培养,是 无血清培养中常用的基础培养液。 12、William’s Medium E :用于肝的长期细胞培养。 13、MCDB 131 培养液:用于培养。 14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用于培养。 15、(PHA ):增加细胞转化和。 如何正确选择细胞培养基 细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了,但却不是最简单的。别小看 细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根 本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。 经典的培养基有很多种,Invitrogen(GIBCO) 、thermo fisher(HyClone) 、Sigma 等公司都可以提供。其中 DMEM 、RPMI 1640 、MEM 、DMEM/F12 都是应用最 广泛的培养基。其他如 M199 、IMDM 、L15 培养基等也用于某些细胞的培养。 ◆ MEM 是由 Eagle’s 基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范 围及浓度。 ◆ Dulbecco 改良的 BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在 常用于贴壁细胞的培养。DMEM 的氨基酸浓度是MEM 的两倍,维生素浓度是 MEM 的4 倍,采用双倍的 HCO3-和 CO2 浓度起到更好的

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