【分子诊断学】_1细胞分子生物学技.pptVIP

临床分子诊断学 绪 论 第一节：定义与历史回顾 通过研究核酸、蛋白生物大分子的结构、功能及其相互作用的规律，来阐明生命的分子基础的科学。 用分子生物学理论、技术和方法研究人体内源性或外源性生物大分子及其体系的存在与否，结构与表达调控的变化，为疾病的预防、预测、诊断、治疗和转归提供信息和决策依据的学科。 分子生物学临床检验简史 分三个阶段： 准备 建立 发展 1976年简悦威首创a-地中海贫血与1978年镰状细胞贫血产前诊断 DNA分子杂交 1985年聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR)技术创立 始于20世纪90年代中期以生物芯片（biochip)技术为代表的高通量密集型技术 日趋成熟的DNA测序技术 第二节：临床分子生物学检验的应用与发展 感染性疾病的诊断与治疗 肿瘤的诊断、治疗、预后以及复发与转移 遗传病的诊断 其它 病毒性肝炎（HBV、HCV)的基因监测 性病相关病原体基因 人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒（HSV）、弓形虫及风疹病毒基因 突发传染性引起重症肺炎的SARS、禽流感病毒 结核杆菌、肺炎支原体、EB病毒、伤寒杆菌与幽门螺旋杆菌 HBV DNA 检测的临床意义 是HBV存在的直接依据 是病毒复制的标志 是患者具有传染性的标志 对两对半起补充作用 判断治疗反映最敏感的指标 检出隐匿性慢性乙型肝炎 在HCV感染的诊断中具有十分重要的意义 常见性传播疾病病原体 淋病双球菌（NG） 沙眼衣原体（CT） 解脲支原体（UU） 人类乳头瘤病毒（HPV） 人类免疫缺陷病毒（HIV） 用于非典型肺炎的诊断 直接检出病原体，早、快与特异 指导治疗方案的制定 流行病学调查 检测TB DNA 的意义 展望 传染病的分子诊断技术 病原体基因组测序技术 早期产前诊断与无创产前诊断 多基因病的分子诊断 个体化医疗 基于药物遗传学与药物基因组学的分子检验 细胞色素P450基因多态性指导个体用药剂量； 线粒体突变12S Rrna A1555G 和C1494T指导氨基糖甙类药物使用 肿瘤个体化治疗 有赖于芯片技术、新一代DNA测序以及生物质谱技术发展 靶向治疗 基因测序突变 BRAF（v600e) PLX4032 黑色素瘤 FISH检测基因含量 HER2 曲妥珠单抗 /赫赛汀 乳腺癌 基因测序突变以及基因检测表达 c-kit 伊马替尼/格列卫 胃间质瘤 基因测序突变 K-RAS BRAF 西妥昔单抗/爱必妥 大肠癌 基因测序突变 EGFR K-RAS BRAF ALK 易瑞沙（吉非替尼） 特罗凯（厄洛替尼） 非小细胞 肺癌 检测方法 检测基因 靶向药物 肿瘤种类 基因表达与用药 K-RAS、BRAF 基因突变检测 不能应用靶向药物 EGFR检测 突变 无突变 突变 应用靶向药物 Eml4-ALK基因检测 无突变 阴性 阳性 靶向ALK分子治疗 化疗药物治疗指导用药 基因测序 检测突变 荧光定量PCR 检测基因表达 基因测序 检测突变 荧光定量PCR 检测基因表达 荧光定量PCR 检测基因表达 荧光定量PCR 检测基因表达 荧光定量PCR 检测基因表达 检测方法 低表达使肿瘤 对药物敏感 TOP2A DNA解旋酶 依托泊苷 判定伊立替康 用药的毒性 UGT1A1尿苷葡萄糖醛酸转移酶 伊利替康 低表达使肿瘤 对药物敏感 RRM1 核酸核苷还原酶 吉西他滨 低表达使肿瘤 对药物敏感 TYMS 胸腺苷合成酶 抗代谢药物 低表达使肿瘤 对药物敏感 ERCC1 核苷酸修复相关基因 铂类 突变影响 药物疗效 CYC19A1 芳香化酶 芳香化酶抑制剂 低表达使肿瘤 对药物敏感 TUBB3 3型微管蛋白 抗微管类药物 紫杉醇,长春新碱 临床意义 靶基因 药物 * * James Dewey Watson （ 1928～） Francis Harry Compton Crick （ 1916～） 1953年，DNA双螺旋结构模型被提出来了，两位创立者是美国生物化学家沃森（James Dewey Watson，1928～）和英国生物物理学家克里克（Francis Harry Compton Crick，1916～2004）。获1962年的诺贝尔生理学医学奖。 1953年，DNA双螺旋结构模型被提出来了，两位创立者是美国生物化学家沃森（James Dewey Watson，1928～）和英国生物物理学家克里克（Francis Harry Compton Crick，1916～2004）。获1962年的诺贝尔生理学医学奖。 一. Watson and Crick 的 DN