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博士论文答辯 草鱼核苷酸结合寡聚化结构域( nucleotide binding oligomerization domain,NOD)基因和 y-千扰素相关基因(IFN- gamma related gene, FN-yrel)的克隆及其表达 指导教师:彭克美教授 聂品研究员 答辩人:陈文钦 华中农业大学动物科技动物医学学院 2010年5月30日 答辯内容 研究 背景 五、课程学 习及文章发 二、草鱼 表情况 汇報 NOD基因 内 创新点 三、草鱼丫 及下步研究 干扰素相关 计划 基因 、研究背景 1.概述 以往为人们所熟知的PRRS主要是一些 膜结合蛋白如甘露糖受体、Tol样受体 CD14和清道失受体等,主要识别胞外环 境的微生物结构成分。最近的研究发现, 胞浆中也存在着识别细菌和病泰成分的 PRRS—核菩酸结合寡聚化结构域(NOD) 蛋白。 研究背景 2NOD蚕白的组成和结构 通过对人类基因数据库同源有哪些信誉好的足球投注网站,现已发现20多 个成员:NOD1CARD4)、NOD2(CARD15)、 NOD3-NOD5、NALP1-14、IPAF、CITA、NAIF 等 NOD蛋白主要由三个不同的结构城组成: (1)LRR:是富合亮氮酸的重复序列,位于C端 (2) NACHT:位于中央,对于NOD蛋白的寡聚体化 和活化非常重要。 (3)效应结构域:位于N端,可以是1个PYD,1个或 2个CARD,或者是3个BIR。 、研究背景 NALP NALP2-4 IPA NAP合 CARD NACHT NAD LRR BIR AI FIIND NOD家族的结构示意图 、研究背景 3NOD的识别作用 已有研究表明,NOD1和NOD2是细胞内 细菌肽聚糖的感受器,能识别细菌肽聚糖 (PGN)的降解产物。NODI识别的最小结构 是革兰氏阴性细菌的产物内消旋三氨基庚三 A(meso-diaminopimelic acid, meSo-DAP) NOD2识别细菌的最基本结构是PGN的胞壁 酰二肽( muramyl dipeptide,MDP)。MDP 几乎存在于所有细菌的PGN中,因此, NOD2既是G+细菌也是G细菌的感受器。 、研究背景 4NOD蛋白的信号转导 在非活化状态,NOD1、NOD2的LRR 和 NACHT结合保持分子处于折叠状态。当 NOD1和NOD2通过LRR和配体结合后可 以打开,通过 NACHT自身寡聚,NOD分子 的CARD和下游RICK分子的CARD结构城 发生嗜同种结合,活化RICK。经过复杂的 磷酸化,活化NF-KB,诱导促炎细胞因子 的转录以及抗菌肽的合成 凵c 卜DD1 RICK ACK Seaotion of pro-inllsmmetcry cytokine (INF,IL-1B nase d-main Immune respones NODs介导的信号传导通路图 、研究背景 5NOD蛋白的生物学功能 NOD蛋白主要的生物学功能是加强 机体免疫糸统探测微生物感染的能力, 产生Ⅱ-1β等促炎因子,调节免疫应答和 炎症反应。近来的研究发现NOD蛋白除 了识别细菌产物外,还可能诱导细胞凋 直接参与细菌感染的控制。现在也 有必威体育精装版报道,证明NOD蛋白也在抗病毒 免疫中起着重要作用。 、研究背景 6选題的目的与意义 尽答对哺乳动物胞内模式识别受体在参与 对细菌的识别、诱导炎症反应的作用等方面进 行了深入的研究,但国内外对鱼类NOD基因的 研究仅有2篇报道。迄今为止,对鱼类NOD基 因的结构,转录和蛋白表达的特征以及是否具 有类似于哺乳动物的功能还是不清楚的。本论 文拟通过对草鱼NOD1和NOD2基因的克隆以 及表达分析,旨在揭示鱼类NOD基因的结构与 表达特征。同时该研究为进一步研究NODs基 因的功能奠定了基础。