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染色目的、原理及方法 主讲:王娟 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 目录页 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 一、染色目的 染色目的: 一般活的微生物细胞含水量都在80%~90%,因此细胞对光的吸收和反射与水溶液相差不大,在普通的光学显微镜下不易识别,经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 二、染色原理 染色过程除了受上述因素影响外,还受细胞通透性、培养基组成、菌龄、染色液中的电解质含量、pH、温度、药物作用等因素的影响。 物理因素:染料通过毛细现象、渗透作用、吸附作用等物理方式渗入细胞。 化学因素:细胞物质和染料的不同性质而发生的化学变化,从而使细胞着色,而且颜色较为稳定。 染色原理: — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 三、染色方法 染色方法: 细菌染色法 死菌 活菌: 用美蓝或TTC(氯化三苯基四唑)等 作活菌染色 正染色 负染色:荚膜染色法等 简单染色法 复合染色法 革兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 吉姆萨氏染色法 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 三、染色方法 1.活菌染色: 活体染色就是用对微生物无毒性的染料,如美蓝、刚果红、中性红等,配成一定浓度,再与一定量的菌液混合,经一段时间后,死菌和活菌会呈现出不同的颜色,这样便可在显微镜下区分开来。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 三、染色方法 2.正染色: 利用染料与细胞组分结合而进行的染色过程。分为简单染色和复合染色两种。 单染色法:只用一种染料对细菌着色。手续简便,但一般只能显示菌体的形态,功能较单一。 复染色法:使用两种或两种以上的染料对细菌染色。除了着色增加反差外,还可以对微生物种类等做出初步判断。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 染色目的、原理及方法 三、染色方法 3.负染色: 与正染色正好相反,细胞不染色而使背景染色,以便看清细胞的轮廓。这种染料不能与细胞组分结合,为不透明燃料,如印度墨水、碳素墨水等。 谢谢
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